基于毒代動力學(xué)方法對普魯士蘭聯(lián)合血液灌流治療急性鉈中毒的研究.pdf

1、目的：
　　鉈及其化合物均有劇毒，急性大量攝入或慢性接觸均可引起中毒。鉈鹽逐漸成為當(dāng)今國內(nèi)外投毒或恐怖襲擊威脅的主要毒物類別之一，而臨床尚無鉈中毒標(biāo)準(zhǔn)化治療方案。結(jié)合現(xiàn)有臨床病例報(bào)道，本研究采用口服普魯士蘭(PB)、血液灌流(HP)以及二者聯(lián)合治療(PB+HP)的措施。在建立犬全血和組織中鉈含量檢測方法的基礎(chǔ)上，首先探究血液灌流(HP)對血鉈的吸附效率;然后建立犬急性鉈中毒模型，分別給予不同治療措施，觀察動物染毒后的癥狀體征及相關(guān)

2、指標(biāo)的變化，探討不同措施對急性鉈中毒的療效，為臨床救治提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。
　　方法：
　　1、建立應(yīng)用石墨爐原子吸收儀檢測血鉈及組織消解液中鉈含量的方法，并完成檢驗(yàn)方法學(xué)驗(yàn)證;
　　2、建立體外染毒模型并監(jiān)測:實(shí)驗(yàn)采用體重8～10Kg的健康成年比格犬9只，雌雄各半（許可證號為SCXK（京）2011-0007）。不染毒，麻醉處死后經(jīng)股動脈取血，根據(jù)實(shí)驗(yàn)動物體質(zhì)量與血容量的換算公式，以高、中、低劑量硝酸亞鉈(Tl

3、NO3)配制成含不同濃度鉈的血液，充分模擬血液在體環(huán)境，進(jìn)行HP，以前一組最后一次灌流結(jié)束后犬血中所含TlNO3的總量確定下一組含鉈血液樣品的配制。應(yīng)用石墨爐原子吸收儀檢測每次灌流前后犬全血鉈含量，并對其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;
　　3、建立體內(nèi)染毒模型并監(jiān)測:實(shí)驗(yàn)采用體重8～10Kg的健康成年比格犬24只，雌雄各半（許可證號為SCXK（京）2011-0003，SCXK（京）2011-0007）。隨機(jī)分為4組(n=6)，全部動物給予硝酸亞鉈

4、(TlNO3)犬半數(shù)致死劑量（LD50=45mg/Kg）灌胃染毒。隨機(jī)分為4組:對照組（僅染毒），PB組（染毒后給予PB灌胃治療），HP組（染毒后給予HP治療），以及二者聯(lián)合治療組（染毒后給予PB+HP治療）。參考美國FDA推薦成人急性鉈中毒的PB治療量，根據(jù)人類與犬體重和給藥劑量的換算公式，確定本實(shí)驗(yàn)PB治療量為467mg/Kg/d;HP每次使用1個炭腎，每次2h，每天1次。各治療組均前5天內(nèi)給予不同的處理措施，共觀察10天。觀察動物

5、染毒后每天的狀態(tài)變化，采集染毒前和染毒后0.5h、1h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h、48h、96h、120h、144h、168h、192h、216h、240h的血液，檢測血中的鉈含量并行毒代動力學(xué)分析;采集染毒前和染毒后12h、24h、48h、96h、120h、144h、168h、192h、216h、240h的血液，監(jiān)測相應(yīng)生化指標(biāo)的變化;留取動物死亡后的腦組織并分區(qū):皮層、海馬、紋狀體、下丘腦、小腦、腦干、肝臟、腎臟

6、，經(jīng)過微波消解后，檢測其中鉈含量。
　　結(jié)果：
　　1檢驗(yàn)方法學(xué)考察結(jié)果
　　血鉈在0～200μg/L范圍內(nèi)，組織消解液中的鉈在0～100μg/L范圍內(nèi)線性良好（相關(guān)系數(shù)分別為0.9996、0.9987）;日內(nèi)精密度(RSD)＜8.7％，日內(nèi)回收率88.2％～117.5％;日間精密度(RSD)＜9.8％，日間回收率89.58％～110.0％。
　　2體外染毒監(jiān)測結(jié)果
　　本部分就HP對血鉈的吸附能力進(jìn)行探究

7、。結(jié)果表明:高、中、低劑量組每次灌流后血鉈濃度（μg/L）均明顯降低，高劑量組從453433.33降至56086.67，中劑量組從64510.00降至3187.33，低劑量組從5396.67降至380.23，且高、中、低劑量組4次灌流后總體吸附率分別為87.63％、95.06％、92.75％(F=4.231，P=0.07)。
　　3體內(nèi)染毒監(jiān)測結(jié)果
　　本部分就不同救治模型的相關(guān)指標(biāo)、參數(shù)進(jìn)行分析，完成不同救治方法療效的研究

8、。結(jié)果如下：
　　3.1血鉈含量變化:各治療組血鉈含量較對照組明顯降低(組間F=8.296，P＜0.001);各治療組間比較，P均＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但PB+HP組下降趨勢最顯著，其次為HP組，最后為PB組;對各采血時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析得到，PB+HP起效時(shí)間（與對照組相比降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的起始時(shí)間）為染毒后6h(P=0.007)，HP起效時(shí)間為8h(P=0.025)，PB起效時(shí)間為24h(P=0.008)，自治療措施起效

9、到觀察期結(jié)束，各治療組較對照組的降低均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)，各治療組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　3.2毒代動力學(xué)參數(shù)變化:各治療組與對照組相比，t1/2在HP組和PB+HP組、Cmax在PB+HP組、AUC0-t在PB組和HP組以及PB+HP組、MRT0-t在HP組較對照組的降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.029、0.022、0.034、0.049、0.028、0.031、0.029)，余差異無統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)意義（P均＞0.05）;各治療組間進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　3.3組織中鉈含量變化:實(shí)驗(yàn)檢測的各組織器官中，腎臟中鉈含量最高;各治療組各腦區(qū)（皮層、海馬、紋狀體、下丘腦、小腦、腦干）及肝腎組織中的鉈含量均較對照組降低，紋狀體中下降最為顯著。各治療組下丘腦、腦干區(qū)域的較對照組的降低無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05），HP組皮層、海馬、小腦區(qū)域較對照組的降低無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.084、0.052、0.0

11、57），PB+HP組皮層區(qū)域較對照組的降低無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.055)，余較對照組降低均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）;各治療組之間進(jìn)行比較，下丘腦、腦干、肝、腎區(qū)域僅PB+HP較PB的降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.038、0.049、0.012、0.013)，以上區(qū)域余治療組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）;海馬、紋狀體、皮層區(qū)域的各治療組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　3.4生化指標(biāo)變化:各治療組

12、的肝腎功能損害（監(jiān)測指標(biāo):ALT、AST、BUN）均較對照組減輕，PB+HP組各指標(biāo)的下降趨勢最為顯著。ALT在PB+HP組、BUN在PB組和HP組以及PB+HP組較對照組的降低均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.043、0.001、0.002、0.001），余差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）;各治療組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　3.5生存趨勢變化:各治療組與對照組相比，生存時(shí)間均有延長的趨勢，PB組趨勢最明顯，

13、但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）;各治療組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　采用石墨爐原子吸收儀檢測血液及組織消解液中鉈濃度定量準(zhǔn)確、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)，所測樣品處理簡單，保存時(shí)間長，適合批量樣本的檢測。HP可以穩(wěn)定、高效地清除血中的鉈，4次灌流即可吸附90％以上的鉈;且在本研究條件下，HP的吸附效率與血鉈含量無關(guān)，即使血鉈含量低，HP也是有效的;PB、HP以及PB+HP治療均為急性鉈中毒的有