玉屏風(fēng)散提取物抗炎作用研究.pdf

1、目的:總結(jié)玉屏風(fēng)散的用藥規(guī)律;探究玉屏風(fēng)散復(fù)方及各單味藥在分別采用乙酸乙酯、丁醇、二氯甲烷及水等不同提取方法后的抗炎作用并篩選最優(yōu)提取方法;初步探索玉屏風(fēng)散抗炎作用機(jī)制。
　　方法:使用文本挖掘的方法總結(jié)玉屏風(fēng)散的用藥規(guī)律，在中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)服務(wù)系統(tǒng)中以“玉屏風(fēng)散”為關(guān)鍵詞下載收集玉屏風(fēng)散文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，利用文本挖掘的方法挖掘相關(guān)中醫(yī)證候、疾病、中成藥、西藥等規(guī)律;體外培養(yǎng)單核巨噬細(xì)胞系U937細(xì)胞，PMA誘導(dǎo)使其成熟后使用LPS刺激，

2、細(xì)胞建立炎癥細(xì)胞模型，觀察不同劑量的玉屏風(fēng)散復(fù)方及單味藥的不同提取物對(duì)細(xì)胞的毒性作用。在此基礎(chǔ)上，選擇不同提取物的合適劑量作用于LPS刺激的U937細(xì)胞，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)培養(yǎng)上清中炎癥因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的含量，篩選最佳提取方法;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)(Western blot)檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)JNK,P-JNK以及P65蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:在與疾病關(guān)系中，玉屏風(fēng)散常用于治療呼吸道

3、感染、哮喘、咳嗽等疾病;在與證候關(guān)系中，常用于風(fēng)寒、氣虛、脾虛等證。在與中成藥關(guān)系，常聯(lián)用腎氣丸、四君子湯、生脈散等中成藥。在與西藥聯(lián)用關(guān)系中，常聯(lián)用西替利嗪、干擾素、抗生素等藥;細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):藥物濃度低于25μ g/ml時(shí)，玉屏風(fēng)散各提取物對(duì)U937細(xì)胞的活力沒有影響，當(dāng)提取物濃度達(dá)到50μ g/ml時(shí)，開始抑制細(xì)胞的活力，出現(xiàn)毒性作用(P＜0.05，P＜0.01)。在二氯甲烷-加速溶劑萃取物(ASE-DCM)，甲醇-加速溶劑萃取物

4、(ASE-MeOH)，二氯甲烷提取物(Decoction DCM)，乙酸乙酯提取物(DecoctionEtOAc)，丁醇提取物(Decoction Butanol)，乳膠提取物(Decoction Emulsion)和水提取物(Decoction Water)中，玉屏風(fēng)散乙酸乙酯提取物作用的U937細(xì)胞上清中TNF-α、IFN-γ、IL-1β的含量最低，與對(duì)照組相比有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05);與對(duì)照組相比，玉屏風(fēng)散乙酸乙