可吸收殼聚糖復(fù)合膜的制備及預(yù)防肌腱粘連功能的實驗研究.pdf

1、目的：在手外科領(lǐng)域中，肌腱粘連是肌腱損傷后常見的并發(fā)癥，其防治一直是外科學(xué)界普遍關(guān)注的問題。肌腱粘連是指肌腱損傷修復(fù)過程中周圍組織的增生和侵入，一定的粘連有利于斷端獲得血管輸送血液的營養(yǎng)，同時還可促使成纖維細(xì)胞接觸肌腱而發(fā)揮修復(fù)作用。但粘連過多會使修復(fù)后的肌腱功能受到限制，嚴(yán)重影響手部的各種運動功能，往往需要通過手術(shù)來松解粘連的肌腱，改善肌腱的滑動功能。精細(xì)的手術(shù)操作和早期的功能鍛煉雖可減輕肌腱粘連的程度，但仍不能完全防止粘連的形成，因

2、此，防止粘連是手外科領(lǐng)域至今尚未能解決的難題。由于肌腱的愈合需要有滑液的營養(yǎng)，因此單純的物理阻隔會影響肌腱的愈合，這就需要找到一種既不影響肌腱愈合，又能阻止其與周圍組織粘連的適合材料。殼聚糖是自然界唯一帶正電荷多糖，其特有的理化性質(zhì)已成為醫(yī)藥界及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點。研究證明，殼聚糖具有良好的成膠成膜性、生物可降解性、降解速度可控性，在醫(yī)用材料領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊。本實驗研究旨在制備一種可預(yù)防粘連的殼聚糖復(fù)合膜，并對其功能、作用機理及應(yīng)用

3、前景進(jìn)行探討。 方法： 1.實驗所需殼聚糖及其衍生物等原料的制備、純化和性質(zhì)評價。 2.確定復(fù)合膜各組分比例，以1，4丁二醇雙縮水甘油醚為交聯(lián)劑，流延法制備羧甲基殼聚糖、N-乙?；瘹ぞ厶恰⒘u丙基殼聚糖復(fù)合膜(CM-C-HP復(fù)合膜)，運用掃描電鏡、紅外光譜、細(xì)胞培養(yǎng)、體內(nèi)植入等方法對復(fù)合膜的理化性質(zhì)、生物相容性、生物降解性進(jìn)行系統(tǒng)評價。 3.以雞為實驗?zāi)Ｐ?，切除趾淺屈肌腱，橫斷趾深屈肌腱，形成趾深屈肌腱斷裂

4、動物模型。設(shè)置實驗組、陽性對照組、陰性對照組和正常對照組，運用生物力學(xué)測試、組織學(xué)檢測、彩超聲像圖等方法對復(fù)合膜預(yù)防肌腱粘連作用進(jìn)行評價。 4.利用MTT、透射電鏡、凝膠電泳、流式細(xì)胞儀等測定方法研究羧甲基殼聚糖和羥丙基殼聚糖共混糖溶液對L929成纖維細(xì)胞生長的影響，從復(fù)合膜抑制成纖維細(xì)胞生長的角度探討復(fù)合膜預(yù)防肌腱粘連的機理。 結(jié)果： 1.制備出的材料樣品符合醫(yī)用材料要求，無菌無熱原，生物相容性好，生物降解性可

5、控。綜合評價各材料多方面性質(zhì)，選擇乙?；瘹ぞ厶?、羧甲基殼聚糖和羥丙基殼聚糖作為制各復(fù)合膜的基本原料。 2.CM-C-HP復(fù)合膜具有良好的柔韌度、機械強度、通透性，無溶血現(xiàn)象，無細(xì)胞毒性和全身急性毒性，對L929成纖維細(xì)胞生長有明顯抑制作用，體內(nèi)植入實驗顯示了良好的生物相容性和生物可降解性，具有比殼聚糖更為優(yōu)良的手術(shù)縫合可操作性。 3.在以雞為肌腱斷裂模型的預(yù)防粘連實驗中，CM-C-HP復(fù)合膜組肌腱吻合口周圍的粘連帶、肉芽

6、組織、膠原纖維及成纖維細(xì)胞均明顯少聚乳酸薄膜組，肌腱活動度生物力學(xué)測試結(jié)果明顯優(yōu)于陰性對照組，說明CM-C-HP復(fù)合膜具有良好的防粘連作用。 4.L929細(xì)胞經(jīng)不同濃度羧甲基殼聚糖和羥丙基殼聚糖共混糖溶液培養(yǎng)24h、48h和96h后，測定MTT、透射電鏡、凝膠電泳、細(xì)胞周期等指標(biāo)，結(jié)果表明共混糖溶液對成纖維細(xì)胞生長有明顯抑制作用，細(xì)胞周期發(fā)生中斷，細(xì)胞被阻滯于G0-G1期。該部分內(nèi)容提示復(fù)合膜通過抑制成纖維細(xì)胞生長來預(yù)防肌腱粘連