利用動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)MRI和Baumann-Rudin模型評(píng)估大鼠急性腎缺血再灌注損傷后腎功能改變.pdf

1、目的：
　　利用動(dòng)態(tài)對(duì)比增強(qiáng)（dynamic contrast enhanced，DCE）MRI監(jiān)測(cè)大鼠急性腎缺血再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）后腎功能改變，評(píng)估腎纖維化對(duì)IRI的影響。
　　材料與方法：
　　本研究通過(guò)了天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院倫理委員會(huì)的審查。28只體重250~350g雄性Sprague-Dawley大鼠（由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部育種中心提供）隨機(jī)平分為4組。組I和組

2、II為健康大鼠，腎臟熱缺血時(shí)間分別為30min和45min；組III和組IV為腎纖維化大鼠，腎臟熱缺血時(shí)間分別為30min，45min。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，4只老鼠意外死亡，最終24只老鼠入組：組I、II、III、IV入組老鼠數(shù)目分別為7、6、6、5。大鼠腎纖維化模型利用腹腔注射順鉑溶液（齊魯制藥有限公司，WA2A1210071）4.5mg/kg來(lái)誘導(dǎo)，注射后4w進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。大鼠腎缺血再灌注模型利用顯微外科手術(shù)，采用微血管夾暫時(shí)阻斷左腎動(dòng)脈血

3、流，夾閉時(shí)間參考分組情況。所有大鼠術(shù)前、術(shù)后第2、5、7、14d DCE-MRI檢查在GE公司3.0 T（HD750，通用電氣公司，密爾沃基，美國(guó)）磁共振儀上進(jìn)行，使用6.0cm孔徑四通道小動(dòng)物相控陣線圈（萬(wàn)康醫(yī)療科技有限公司，江蘇，中國(guó)）完成。對(duì)大鼠雙腎區(qū)進(jìn)行冠狀位脂肪抑制快速恢復(fù)快速自旋回波序列（FRFSE）T2加權(quán)圖像的采集，之后對(duì)雙腎區(qū)進(jìn)行增強(qiáng)冠狀位3D肝臟容積加速采集(1iver acquisition with volume

4、 acceleration，LAVA)掃描。此后，經(jīng)鼠尾靜脈注射經(jīng)0.9％生理鹽水稀釋后濃度為0.125mol/L的Gd-DTPA（釓噴酸葡胺注射液，北陸藥業(yè)，中國(guó)北京），注藥總量0.04mmol/kg體重，注射速度100uL/s。注藥開始立即重復(fù)采集LAVA序列。以Baumann和Rudin提出的一級(jí)速率常數(shù)（kcl）測(cè)量方法為基礎(chǔ)，利用東北大學(xué)協(xié)助開發(fā)的軟件對(duì)LAVA圖像進(jìn)行分析，獲得腎臟的速率常數(shù)（kcl）。使用單因素方差分析（O

5、ne-way analysis of variance，ANOVA）和Bonferroni’s post-hoc檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)數(shù)值差異采用t檢驗(yàn)（Student t-test）。術(shù)后第14d DCE-MRI掃描結(jié)束后取雙腎進(jìn)行切片及蘇木素-伊紅（HE染色）。依據(jù)Leemans et al提出的方法對(duì)各組左右腎皮髓質(zhì)交接區(qū)腎小管的損傷程度進(jìn)行等級(jí)評(píng)估。所得數(shù)據(jù)使用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)進(jìn)行多組獨(dú)立樣本比較，

6、之后使用bonferroni法校正p值后進(jìn)行兩兩比較。
　　結(jié)果：
　　1.各組術(shù)前雙腎kcl無(wú)差異（P>0.05），術(shù)后除組III各時(shí)間點(diǎn)外，各組雙腎kcl均有差異（P<0.05）。除組III外，各實(shí)驗(yàn)組左腎術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)kcl與術(shù)前相比均減低（P<0.05）。組I、II、III右腎kcl術(shù)后在各時(shí)間點(diǎn)較術(shù)前無(wú)顯著變化（P>0.05），而組IV，除了術(shù)后第2d右腎與術(shù)前無(wú)差異外，術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)與術(shù)前均有差異。2.組I大鼠左腎k

7、cl于IRI后第7d達(dá)到最低值，之后于第14d呈現(xiàn)恢復(fù)趨勢(shì)（P<0.05,與左腎術(shù)前比較），而組II健康老鼠左腎kcl持續(xù)下降且于第14d無(wú)恢復(fù)趨勢(shì)（P<0.05,與左腎術(shù)前比較）。
　　3.組III纖維化大鼠左腎kcl于術(shù)后減低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,與左腎術(shù)前比較)。組IV纖維化大鼠左腎kcl于術(shù)后第七天降到最低值，于2w趨于穩(wěn)定(P<0.05,與左腎術(shù)前比較)。
　　4.各組雙腎間病理學(xué)得分結(jié)果均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

8、P<0.05）。組I與組III、組IV，組II與組IV左腎間及右腎間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.0083）。組II與組III右腎間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0083），而左腎間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.0083）。組III與組IV左腎間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0083），而右腎間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組I與組II左腎間及右腎間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.0083）。
　　結(jié)論：
　　本研究利用DCE-MRI發(fā)現(xiàn)當(dāng)健康大鼠缺血