炎癥促進(jìn)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠脂肪變肝細(xì)胞脂質(zhì)異常集聚的分子機(jī)制.pdf

1、第一部分四氯化碳致小鼠肝脂肪變性的分子機(jī)制
　　目的:探討四氯化碳(CCl4)促進(jìn)小鼠肝細(xì)胞脂肪變性的分子機(jī)制。
　　方法:將6～8周齡的C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(control)(n=6)和CCl4組(CCl4)(n=6)。對(duì)照組和CCl4組分別給予皮下注射生理鹽水(NS)和CCl42周，2周后處死小鼠，留取肝臟?；瘜W(xué)酶促比色法檢測(cè)小鼠肝臟總膽固醇(TC)含量，油紅O染色觀察肝臟脂肪變程度，實(shí)時(shí)熒光定量PCR

2、和western bot檢測(cè)小鼠LDLr、SCAP和SREBP-2的基因和蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:CCl4組的肝組織的TC含量表達(dá)比對(duì)照組的明顯升高(P＜0.05)，油紅O染色顯示CCl4組肝組織可見(jiàn)大量的脂質(zhì)堆積。CCl4組的LDLr、SREBP-2、SCAP的mRNA和蛋白表達(dá)比對(duì)照組明顯增高(P均＜0.05)。
　　結(jié)論:CCl4可能通過(guò)上調(diào)肝細(xì)胞LDLr、SREBP-2、SCAP的表達(dá)，導(dǎo)致小鼠肝細(xì)胞脂質(zhì)異常堆積。

3、
　　第二部分炎癥促進(jìn)四氯化碳誘導(dǎo)的小鼠脂肪變肝細(xì)胞脂質(zhì)集聚的相關(guān)指標(biāo)變化
　　目的:探討炎癥促進(jìn)CCl4所致的脂肪變肝細(xì)胞進(jìn)一步脂質(zhì)集聚形成脂肪肝的分子機(jī)制。
　　方法:將6～8周齡的C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(n=6)和炎癥組(n=6)。2組均預(yù)先CCl4皮下注射2周，再分別給予對(duì)照組(CCl4+NS)和炎癥組(CCl4+casein)生理鹽水(NS)和酪蛋白(casein)皮下注射16周，18周后留取

4、小鼠血清及肝組織，稱量小鼠體質(zhì)量及肝質(zhì)量計(jì)算肝指數(shù)評(píng)估肝臟受損情況，ELISA法檢測(cè)血清炎癥因子，酶法檢測(cè)小鼠血清脂質(zhì)水平，化學(xué)酶促比色法檢測(cè)小鼠肝組織的脂質(zhì)水平，油紅O染色觀察小鼠肝組織的脂質(zhì)集聚情況，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)小鼠SREBP-1、SREBP-2、LDLr、SCAP、HMGCR的基因表達(dá)水平，免疫組化和western blot檢測(cè)上述靶基因的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:炎癥組的肝指數(shù)較對(duì)照組升高(P＜0.05)，炎癥組

5、的血清淀粉樣蛋白(SAA)、IL-6和TNF-α的表達(dá)均比對(duì)照組的明顯升高(P均＜0.05），炎癥組的血清HDL-C、LDL-C、TC比對(duì)照組的明顯降低（P均＜0.05），肝臟TC含量較對(duì)照組升高(P＜0.05)，HE及油紅O染色顯示炎癥組可見(jiàn)大量的脂質(zhì)堆積。炎癥組的LDLr、SREBP-2、SCAP、SREBP-1、HMGCR的mRNA和蛋白表達(dá)比對(duì)照組明顯增高(P均＜0.05)。
　　結(jié)論:炎癥可能通過(guò)上調(diào)肝細(xì)胞LDLr、SR