長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞EC109凋亡.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、研究目的：
　　探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在長(zhǎng)鏈非編碼RNA MEG3誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞凋亡的作用及其分子機(jī)制。
　　材料和方法：
　　制備表達(dá)MEG3的質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)染食管癌EC109細(xì)胞，分為對(duì)照組（Control，轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒pcDNA3.1）及實(shí)驗(yàn)組（轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-MEG3），按以下方法進(jìn)行試驗(yàn)：
　　(1) RT-PCR檢測(cè)MEG3轉(zhuǎn)染后在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)情況；
　　(2)CellCounting Kit8(CC

2、K8)染色法檢測(cè)過(guò)表達(dá)MEG3后細(xì)胞生長(zhǎng)抑制情況；Annexin V-FITC/Propidium Iodide(Annexin V/PI)雙染色法檢測(cè)過(guò)表達(dá)MEG3后細(xì)胞凋亡率變化；
　　(3) Western blot檢測(cè)過(guò)表達(dá) MEG3后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白 GRP78、PERK、ATF6、IRE1-α表達(dá)情況； Western blot檢測(cè)過(guò)表達(dá)MEG3后凋亡通路相關(guān)蛋白CHOP表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.成

3、功在食管癌EC109細(xì)胞中過(guò)表達(dá)MEG3；
　　2. CCK8染色法結(jié)果表明：過(guò)表達(dá)MEG3顯著抑制了EC109細(xì)胞生長(zhǎng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Annexin V/PI雙染色法結(jié)果表明：過(guò)表達(dá)MEG3后EC109細(xì)胞凋亡率顯著上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；
　　3. Western blot結(jié)果表明：外源性MEG3顯著增加了EC109細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路相關(guān)蛋白GRP78、PERK、ATF6、IRE1-α及凋亡通路相關(guān)蛋白CHOP

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