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文檔簡(jiǎn)介
1、脂聯(lián)素是一種重要的脂肪細(xì)胞因子,主要在白色脂肪組織中表達(dá)和分泌。已有研究表明,脂聯(lián)素具有抗糖尿病、抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗炎的活性,而球狀脂聯(lián)素(脂聯(lián)素的球狀結(jié)構(gòu)域,gapM1)在較低劑量時(shí)就有著同樣的生物學(xué)效應(yīng)。所以,希望將球狀脂聯(lián)素開(kāi)發(fā)為一種新藥,用來(lái)治療糖尿病。成功地用畢赤酵母工程菌進(jìn)行了重組人gapM1的表達(dá),并且建立了合理的純化工藝制備了高純度的球狀脂聯(lián)素。同時(shí)用高劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的方法建立了小鼠的Ⅰ型糖尿病模型,用高脂
2、飼料和低劑量STZ相結(jié)合的方法建立了Ⅱ型糖尿病大鼠模型,用來(lái)鑒定gapM1治療糖尿病的生物學(xué)活性。
SDS-PAGE證實(shí)gapM1在畢赤酵母中得到了高表達(dá),Western blot證明表達(dá)的蛋白具有g(shù)apM1抗原性。通過(guò)發(fā)酵和純化,用30L的發(fā)酵罐得到了200mg以上的球狀脂聯(lián)素(純度95％以上)。而重組人gapM1緩解了Ⅰ型糖尿病小鼠的高血糖癥狀,顯著降低了Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖(34.2％)、血甘油三酯(79.6％)和血
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