磺化殼聚糖的制備、性能及其三維支架構(gòu)建.pdf

1、再生醫(yī)學(xué)材料的對(duì)缺損組織或器官的再生修復(fù)性能主要取決于材料對(duì)細(xì)胞行為的調(diào)控能力,而調(diào)控細(xì)胞行為的關(guān)鍵在于賦予再生醫(yī)學(xué)材料生物活性。生長(zhǎng)因子是生物體內(nèi)重要的信號(hào)分子,將其與材料復(fù)合可賦予材料傳遞特定生物信號(hào)的能力。但由于生長(zhǎng)因子極易失活,因而設(shè)計(jì)開發(fā)一種可以保護(hù)生長(zhǎng)因子活性的材料是再生醫(yī)學(xué)材料領(lǐng)域面臨的重大問(wèn)題。肝素作為一種廣泛存在于生物體內(nèi)的氨基葡聚糖,可以與多種重要的生長(zhǎng)因子特異性結(jié)合,從而保護(hù)生長(zhǎng)因子的活性。但臨床研究表明,短期使用

2、肝素存在大出血的危險(xiǎn),而長(zhǎng)期使用則會(huì)造成骨質(zhì)疏松。針對(duì)再生醫(yī)學(xué)材料中生長(zhǎng)因子活性保護(hù)難題,以及肝素存在的副作用,本文旨在通過(guò)對(duì)殼聚糖進(jìn)行磺化改性,從而模擬肝素結(jié)構(gòu),獲得具有與肝素相似的特異性結(jié)合、保護(hù)、活化特定生長(zhǎng)因子的性能；同時(shí)以磺化殼聚糖為原料,制備能與相應(yīng)生長(zhǎng)因子發(fā)生特異性作用的平面和三維支架材料。
　　 用三甲胺-三氧化硫,1,3-丙磺酸內(nèi)酯,氯磺酸,濃硫酸為磺化試劑,分別對(duì)殼聚糖進(jìn)行了磺化改性,獲得了在2-N,3,6-

3、O,2-N-磺丙基三個(gè)位點(diǎn)發(fā)生磺化反應(yīng)的產(chǎn)物。通過(guò)紅外光譜、核磁共振分析、元素分析和凝膠滲透色譜等方法表征了產(chǎn)物結(jié)構(gòu)、磺化度和分子量。以堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)為目標(biāo)因子,考察了不同磺化度和不同磺化位點(diǎn)產(chǎn)物對(duì)生長(zhǎng)因子活性的影響。實(shí)驗(yàn)表明在2-N位發(fā)生磺化反應(yīng)的殼聚糖,對(duì)bFGF活性有較強(qiáng)的保護(hù)作用。
　　 將磺化產(chǎn)物通過(guò)戊二醛接枝到胺解聚己內(nèi)酯(PCL)平面膜上,以構(gòu)建能與生長(zhǎng)因子發(fā)生特異性作用的材料。通過(guò)鐵氰化鉀法測(cè)

4、定了磺化殼聚糖的接枝量,研究了接枝前后PCL膜的表面形貌、親疏水性、表面Zeta電位等性能。以血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)為目標(biāo)因子,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法考察了磺化殼聚糖接枝PCL平面膜吸附目標(biāo)因子,并保護(hù)目標(biāo)因子活性的能力。實(shí)驗(yàn)表明,2-N位磺化的殼聚糖改性的PCL膜對(duì)VEGF的吸附和保護(hù)起了更重要的作用。
　　 用EDC/NHS將磺化殼聚糖接枝到膠原平面上,研究了不同接枝條件對(duì)磺化殼聚糖接枝量的影響。成功通過(guò)變化接枝溶液的