外源茉莉酸甲酯、犬尿氨酸和氨基氧乙酸對(duì)大白菜BrCYP79B2-B3表達(dá)及相關(guān)生理生化指標(biāo)的影響.pdf

1、Z h e j i a n g A & F U n i v e r s i t yD i s s e r t a t i o nf o r t h e D e g r e eo f M a s t e rT h e e f f e c to fe x o g e n o u s m e t h y l j a s m o n a t e ，k y n u r e n i n ea n da m i n o x y a c e t

2、 i ca c i d O i le x p r e s s i o no f B r C Y P 7 9 8 2 ／B 3 a n d t h er e l a t e dp h y s i o l o g i c a l a n d b i o c h e m i c a l f a c t o r si nC h i n e s ec a b b a g eC a n d i d a t e ：Z H A N G H a oA d

3、 v i s e r ：Z A N G Y u n x i a n g ，A s s o c i a t e P r o f e s s o rS p e c i a l t y ：H o r t i c u l t u r eD a t e o f S u b m i s s i o n ：D e c e m b e r , 2 0 1 5Z h e j i a n g A & F U n i v e r s i t yL i

4、 n ’ z h e j i a n，P ．R L i na n , z h e j i a n g p r o v i n c e R ．C h i n a7， ．D e c e m b e r ，2 0 1 5摘要摘要大白菜( B r a s s i c a r a p as s p ．p e k i n e n s i s ) 作為我國(guó)種植面積最大的十字花科葉用蔬菜之一，在我國(guó)的蔬菜供應(yīng)中占據(jù)非常重要的地位。硫代葡萄糖苷( 簡(jiǎn)稱(chēng)硫

5、苷) 是一種主要存在于十字花科植物中的重要次生代謝產(chǎn)物，其水解產(chǎn)物具有較強(qiáng)的防癌抗癌、抗病蟲(chóng)等功能，因此，研究者們?cè)絹?lái)越關(guān)注硫苷合成相關(guān)基因的研究。吲哚族硫苷和I A A 代謝途徑中具有共同的合成前體物質(zhì)一吲哚．3 ．乙醛肟，由B r C Y P 7 9 8 2 ／B 3 催化合成。因此，克隆大白菜中B r C Y P 7 9 8 2 ／B 3 各拷貝基因，分析它們?cè)谶胚嶙辶蜍蘸虸 A A代謝途徑中的功能具有十分重要的意義。本文克隆了B

6、 r C Y P 7 9 8 2 ／B 3 基因，用吲哚族硫苷和I A A 合成誘導(dǎo)劑和抑制劑處理大白菜，分析硫苷和I A A 含量變化與目的基因表達(dá)水平變化的關(guān)系。主要研究結(jié)果如下：1 ) 從大白菜中克隆到B r C Y P 7 9 8 2 ．，基因，構(gòu)建其超表達(dá)載體，為研究B r C Y P 7 9 8 2 ／B 3 基因的功能分化和通過(guò)基因工程方法改變硫苷含量打下基礎(chǔ)。2 ) 運(yùn)用熒光定量P C R ( R e a l ．T i

7、m e P C R ) 技術(shù)分析了硫苷和L A A 合成誘導(dǎo)劑( 茉莉酸甲酯) 、抑制劑氨基氧乙酸( A O A ) 和犬尿氨酸( K y n ) 處理后，吲哚族硫苷和n A 吲哚丙酮酸途徑中相關(guān)基因的表達(dá)水平變化。結(jié)果表明，茉莉酸甲酯處理后，吲哚族硫苷合成基因和轉(zhuǎn)錄因子M Y B l 2 2 表達(dá)量均高于對(duì)照。氨基氧乙酸處理后，吲哚族硫苷合成基因在葉片中表達(dá)水平低于對(duì)照，而根系中的B r C Y P 7 9 8 2 ．J 、B r C

8、 Y P 7 9 8 3 、B r C Y P 8 3 8 1 和多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平顯著提高。犬尿氨酸處理后，吲哚族硫苷合成基因、轉(zhuǎn)錄因子M Y B l 2 2 和I A A 吲哚丙酮酸途徑合成基因主要在根系中表達(dá)。3 ) 研究了葉面噴施茉莉酸甲酯、犬尿氨酸和氨基氧乙酸對(duì)大白菜生長(zhǎng)和生理生化指標(biāo)的影響。噴施氨基氧乙酸對(duì)于大白菜生長(zhǎng)影響最大。氨基氧乙酸處理后，大白菜根系變短，丙二醛含量和抗氧化酶活性都提高，光合作用減弱，脂肪族和吲哚族