小球藻Chlorella sorokiniana NK-01分離鑒定及其應(yīng)用研究.pdf

1、小球藻（Chlorella sp.）作為微藻的一種，具有繁殖速度快、產(chǎn)量高、富含多種營養(yǎng)物質(zhì)以及可吸收氨用于環(huán)保等多種特點(diǎn)，已成為生物煉制和生物制造的研究熱點(diǎn)之一[1]。小球藻可以在自養(yǎng)、異養(yǎng)以及混合培養(yǎng)的條件下生長[2]，小球藻（Chlorella sorokinianaNK-01）在一定的光照強(qiáng)度以及添加葡萄糖的條件下可以快速生長、積累較高的葉綠素和脂質(zhì)。
　　本研究以海水養(yǎng)殖池正常水體樣品中，分離得到一株小球藻，經(jīng)分類鑒定（

2、電子顯微鏡、18S rRNA序列分析等）確定為Chlorella sorokinianaNK-01。采用異養(yǎng)和光照混合培養(yǎng)方式，優(yōu)化了小球藻生物量、脂質(zhì)、葉綠素高產(chǎn)條件。最后，探索了小球藻在廢水處理中對COD和氮的作用。
　　本研究選擇響應(yīng)面法[3]為主要的優(yōu)化方法進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)，首先通過PB實(shí)驗(yàn)對培養(yǎng)基中不同成分對Chlorella sorokinianaNK-01的優(yōu)化產(chǎn)物的影響進(jìn)行對比，選取葡萄糖、硝酸鈉以及磷酸氫二鉀作為待優(yōu)

3、選項(xiàng)對小球藻生物量、葉綠素和脂質(zhì)進(jìn)行優(yōu)化分析。然后，根據(jù)單因素的實(shí)驗(yàn)方法得到Design-Expert軟件實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的初始范圍，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。將得到的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析以及可行性分析，最終得到最優(yōu)培養(yǎng)基配比（葡萄糖24.06 g/L、硝酸鈉1.93 g/L和磷酸氫二鉀0.26 g/L），進(jìn)行搖瓶驗(yàn)證以及30L發(fā)酵罐發(fā)酵驗(yàn)證。搖瓶驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果小球藻生物量8.658g/L，葉綠素含量50.412mg/L，脂質(zhì)含量1.93g/L。30L發(fā)酵罐發(fā)酵

4、驗(yàn)證結(jié)果為：小球藻生物量8.658g/L，葉綠素的含量50.4123 mg/L，脂質(zhì)的產(chǎn)量1.93 g/L，分別是初始培養(yǎng)基的10.8倍、2.38倍和9.65倍。
　　本研究利用分離得到的小球藻Chlorella sorokinianaNK-01分別對人工廢水、高氨氮廢水以及污水處理廠樣品廢水進(jìn)行了處理研究。結(jié)果顯示出小球藻Chlorella sorokinianaNK-01適宜處理酒石酸鉀鈉為碳源的人工污水。對不同濃度的高氨氮廢