茯苓皮中三萜類化學成分的分離純化、結構鑒定及茯苓藥材指紋圖譜的研究.pdf

1、茯苓為多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.)Wolf的干燥菌核，是我國珍貴的傳統(tǒng)中藥材，在我國已有兩千多年的藥用歷史，常與其他中藥方劑配伍使用，作為利尿、鎮(zhèn)靜、滋補的良藥?，F(xiàn)代藥理研究表明，三萜類成分是茯苓主要的藥效成分之一。茯苓皮作為茯苓菌核的干燥外皮，在加工過程中，以往常常被當成廢料處理，然而近年研究發(fā)現(xiàn)茯苓皮中所含有的三萜類成分不僅豐富，還具有一些特征性成分。故本文以茯苓皮為研究對象，對其三萜類成分進行提取、分離、純

2、化與鑒定;并利用UPLC-UV-MS的方法，對收集到的不同藥用部位不同產(chǎn)地的的茯苓藥材進行指紋圖譜比較研究。
　　 本論文采用堿溶酸析法，將茯苓皮藥材用甲醇回流提取，提取液濃縮至浸膏狀，加水混懸后，用乙醚萃取，得到的乙醚部分分別用飽和的NaHCO3水溶液和5％的NaOH水溶液萃取，然后兩部分的萃取物均用6mol/L HC1酸化，經(jīng)乙醚萃取后，得到FractionA（飽和NaHCO3層）和Fraction B（5％的NaOH層）兩

3、個部位。
　　 利用柱色譜法、薄層色譜法、制備高效液相色譜法和核磁共振等技術對Fraction A（飽和的NaHCO3層）部位中所含三萜類成分進行分離純化和鑒定，共獲得8個單體化合物，其中5個化合物的結構經(jīng)1H-NMR和13C-NMR核磁共振檢測后結構已確定，分別為:茯苓酸A(Poricoic acid A)、茯苓酸B(Poricoic acid B)、茯苓酸AM(Poricoic acid AM)、茯苓酸G(Poricoic

4、acid G)、去氫土莫酸(Dehydrotumulosic acid);另外3個化合物的結構尚未確定，經(jīng)UPLC-UV-MS鑒定，純度和分子量已知。該實驗為進一步研究茯苓的藥效物質基礎，特別是茯苓皮中所含有特征性3，4-開環(huán)-羊毛甾類三萜成分提供了參考和依據(jù)。
　　 本實驗利用液質聯(lián)用的方法建立了茯苓藥材的UPLC-UV-MS指紋圖譜，共標定了22個色譜峰，其中9個峰共有且含量較高。通過與實驗室自制的6個單體化合物[去氫土莫酸

5、(Dehydrotumulosicacid)、茯苓酸A(Poricoic acid A)、茯苓酸B(Poricoic acid B)、茯苓酸AM(Poricoic acid AM)、茯苓酸(Pachymic acid)、去氫茯苓酸(Dehtdrapachymic acid)]與色譜峰比對，并結合離子質譜圖質荷比與相關文獻參照，初步歸屬了其中的17個色譜峰。方法學考察結果符合指紋圖譜技術要求;相似度和聚類分析結果表明，茯苓皮和茯苓塊中三萜