利用間歇浸沒式生物反應(yīng)器(TIBs)進(jìn)行香蕉組培快繁研究.pdf

1、間歇浸沒式生物反應(yīng)器(TIBs)是近年來新研究開發(fā)的一種用于植物組織培養(yǎng)和植物次生代謝物研究的系統(tǒng)。TIBs以液體培養(yǎng)基為基礎(chǔ),在此基礎(chǔ)上進(jìn)行自動(dòng)化機(jī)械化來降低生產(chǎn)成本。與傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)相比TIBs具有高增殖率、組培苗質(zhì)量好、低成本等優(yōu)點(diǎn),為進(jìn)一步促進(jìn)香蕉組培商業(yè)化,本試驗(yàn)以廣西植物組培有限公司提供的經(jīng)半固體培養(yǎng)第六代香蕉不定芽(Musa AAA Cavendish var.Williams B6)為材料,對(duì)傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)和TIBs培養(yǎng)

2、進(jìn)行比較研究同時(shí)對(duì)TIBs培養(yǎng)中不同因素對(duì)香蕉組培快繁的影響進(jìn)行研究。試驗(yàn)主要結(jié)果如下:
　　 1.以第六代香蕉不定芽為材料,利用TIBs進(jìn)行香蕉組培快繁研究,試驗(yàn)研究表明:利用TIBs系統(tǒng)可以有效提高香蕉組織培養(yǎng)的增殖率,它的增殖率達(dá)到14.0以上,是傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)的3-4倍;當(dāng)接種材料為第七代香蕉不定芽,接種密度為100 mL培養(yǎng)基/外植體時(shí),最有利于香蕉組培苗的生長(zhǎng)和增殖;當(dāng)糖濃度為30 g/t,時(shí),最有利于香蕉苗的增殖和

3、生根;在TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)中,當(dāng)6-BA濃度為2.0 mg/L,時(shí),對(duì)香蕉組培苗增殖最有利,而當(dāng)GA濃度為1.0 mg/L時(shí),NAA濃度為1.0 mg/L時(shí),最有利于香蕉組培苗生根和生長(zhǎng);間歇頻率為4 min/3h時(shí),最有利于香蕉組培苗增殖和生長(zhǎng),而當(dāng)間歇頻率為4 min/6 h時(shí),最有利于香蕉組培苗根的誘導(dǎo)及生長(zhǎng)。
　　 2.以第六代香蕉不定芽為材料,在增殖階段,傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.

4、1 mg/L+6.0 g/L瓊脂粉+30 g/L蔗糖,而伸長(zhǎng)階段,傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)配方為MS+GA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L+6.0 g/L瓊脂粉+30 g/L蔗糖,TIBs在增殖和生根階段培養(yǎng)基不添加瓊脂粉,其余培養(yǎng)基成分與傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)相同。培養(yǎng)50天后,對(duì)兩者進(jìn)行比較研究,結(jié)果表明,TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)與傳統(tǒng)培養(yǎng)相比擁有明顯的優(yōu)勢(shì),TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)出來的香蕉組培苗增殖率、株高、莖粗、根數(shù)、葉片數(shù)等形態(tài)指標(biāo)均高于傳統(tǒng)半固體培

5、養(yǎng);且移栽成活率也略高于傳統(tǒng)半固體培養(yǎng)。
　　 3.在移栽后20天、40天、60天對(duì)兩種組培方式香蕉組培苗的光合特性及生理活性等進(jìn)行研究,結(jié)果表明,隨著移栽天數(shù)的增加,兩種香蕉組培苗的光合速率、氣孔導(dǎo)度等逐漸增加,胞間CO2濃度逐漸下降,但TIBs香蕉苗幾個(gè)指標(biāo)均高于傳統(tǒng)組培苗;兩種香蕉苗SOD、POD、葉綠素含量也隨著移栽天數(shù)的增加而增大,TIBs系統(tǒng)培養(yǎng)均高于傳統(tǒng)培養(yǎng);MDA含量隨移栽時(shí)間的增加而降低,而傳統(tǒng)培養(yǎng)苗MDA高于