補腎活血法對腎虛血瘀型不育患者精子DNA完整性的臨床研究.pdf

1、目的：
　　探討補腎活血法（強精片）的抗氧化作用對腎虛血瘀型男性不育癥患者精子DNA損傷的影響，初步探究補腎活血法（強精片）改善精子DNA損傷的可能作用機制，為臨床治療男性不育癥尋找一種有效治療法則及方藥，并為強精片的進一步開發(fā)利用打下基礎(chǔ)。
　　方法：
　　收集2015年1月到2015年12月就診于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院的男性不育患者，遴選出72例祖國醫(yī)學(xué)辨證為腎虛血瘀型的患者，且女方無生殖機能異常。參照《人類精子學(xué)

2、》（2013版）、《歐洲泌尿外科學(xué)會疾病診斷治療指南》（2014版）、《人類精液檢查與處理實驗室手冊》（WHO第五版，2009年）以及相關(guān)試劑盒說明書等制定西醫(yī)診斷標(biāo)準；并參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》（2002版)、《中國中西醫(yī)結(jié)合男科學(xué)》（張敏健、郭軍主編，2011版)制定中醫(yī)診斷標(biāo)準，采取隨機、對照的方法，將72例精子DNA完整性受損的男性不育癥患者分為兩組，兩組各36例，試驗組使用院內(nèi)制劑“強精片”治療，由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)

3、院加工房提供，規(guī)格100片/瓶，每片0.3g。用法為每日3次，每次4片，飯后溫水吞服，對照組使用五子衍宗丸治療，由成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院提供(承德天原藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)），每盒10袋，每袋6g。每次1袋，1日2次，飯后溫水沖服。兩組療程均為3個月。通過檢測受試者服藥前后精子DNA碎片率(DNA fragmentation index,DFI)、活性氧自由基（reactiveoxygen spe-cies,ROS)、精楽過氧化物歧化酶(

4、superoxide dismutase，SOD)的變化以及中醫(yī)腎虛血瘀證候評分表來評價療效。
　　實驗數(shù)據(jù)用SAS(JMP9.0)軟件包進行處理：數(shù)據(jù)分析時，滿足正態(tài)分布的成組定量數(shù)據(jù)采用t檢驗，組間均數(shù)的比較用單因素方差分析，不滿足正態(tài)分布，用非參數(shù)檢驗。率的比較用卡方檢驗，方差不齊采用秩和檢驗，各項指標(biāo)結(jié)果用均數(shù)土標(biāo)準差（x±s)表示，以P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、通過對72例受試者年齡與DF

5、I、ROS、SOD相關(guān)性線性分析，年齡與DFI線性擬合比率F=4.50，P＜0.0001，具有統(tǒng)計學(xué)意義，受試者年齡與DFI呈正相關(guān)；DFI與ROS線性擬合比率F=0.47，P＜0.0001，具有統(tǒng)計學(xué)意義，受試者ROS與DFI呈正相關(guān);ROS與SOD線性擬合比率F=-7.86，P＜0.0001，具有統(tǒng)計學(xué)意義，ROS與SOD呈負相關(guān)。
　　2、試驗組采用補腎活血法（強精片）治療3個月，通過數(shù)據(jù)分析，其DFI平均值=10.95±4

6、.55％，Z=9.2728，P=0.0045，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。ROS平均值=13.74±8.88RLU/s，Z=4.20，P=0.0002，P＜0.05，差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。SOD平均值=28.01±11.18ng/ml，Z=7.19，P=0.0112，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、對照組采用五子衍宗丸治療三個月，通過數(shù)據(jù)分析，DFI平均值=15.38±6.33%，Z=8.36，P＜0.000

7、1，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。ROS平均值=20.37±12.65RLU/s,Z=3.21，P=0.0002，P＜0.05，差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義。SOD平均值=20.20±6.25ng/ml,Z=6.98，P＜0.0001，差異具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4、試驗組治療前DFI平均值=25.24±9.76%，經(jīng)過3個月的治療后，試驗組DFI平均值為10.95±4.55%，Z=9.2728，P=0.0045，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計

8、學(xué)意義，試驗組DFI較治療前顯著下降。
　　5、試驗組治療前ROS平均值=41.46±19.28RLU/s，經(jīng)3個月的治療后，試驗組治療后ROS平均值為13.74±8.88RLU/s,Z=4.20，P=0.0002，P＜0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。ROS平均值較治療前有顯著下降。
　　6、試驗組治療前SOD平均值=14.19±7.15ng/ml，治療后ROS平均值為28.01±11.18ng/ml,Z=7.19，P=0.011

9、2，P＜0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。試驗組SOD平均值較治療前有顯著提高。
　　7、試驗組與對照組通過3個月治療后，中醫(yī)證候評分經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析后，試驗組臨床控制5例，顯效15例，有效8例，無效8例，總有效率77.78%;對照組臨床控制3例，顯效12例，有效9例，無效12例，總有效率66.67%。通過對總有效率的比較，總有效率P=0.0121，P＜0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。說明試驗組運用補腎活血法（強精片）可顯著改善中醫(yī)臨床癥狀，且優(yōu)于

10、對照組。
　　結(jié)論：
　　1、年齡與不育患者精液中DFI含量具有相關(guān)性，隨著年齡的增長，不育患者DFI升高；ROS隨著DFI升高而升高，SOD含量隨著ROS升高而呈下降趨勢。
　　2、相比五子衍宗丸，“強精片”可顯著降低男性不育癥患者精液中精子DNA碎片率、活性氧自由基水平。
　　3、相比五子衍宗丸，“強精片”可顯著提高男性不育癥患者精漿過氧化物歧化酶活性。
　　4、“強精片”與五子衍宗丸相比，“強精片”可