維生素C對黏桿菌素致DRG神經(jīng)元細(xì)胞毒性的頡頏作用.pdf

1、黏桿菌素對革蘭氏陰性敏感菌具有非常強(qiáng)大的殺滅作用，是一種治療多重耐藥性革蘭氏陰性菌感染的特效藥物。雖然黏桿菌素由于臨床應(yīng)用中表現(xiàn)出的腎毒性和神經(jīng)毒性而被人們放棄使用數(shù)十余年，但由于近年來銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯桿菌等革蘭氏陰性菌感染的加劇，且耐藥性越來越強(qiáng)的環(huán)境下，黏桿菌素因其強(qiáng)大的殺菌作用和不易產(chǎn)生耐藥性的特點(diǎn)，重新被人們重視起來。所以，探尋和發(fā)現(xiàn)能夠降低或消除黏桿菌素毒性作用的藥物的研究具有重要的理論和臨床實(shí)踐意義。
　　

2、作為一種抗毒性藥物和抗氧化劑，維生素C被廣泛應(yīng)用于治療各種藥物引起的毒副作用。最新研究表明，維生素C對黏桿菌素的腎毒性具有很多好的頡頏作用，但并未有實(shí)驗(yàn)表明其對黏桿菌素所致的外周神經(jīng)毒性具有頡頏作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)利用體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，以培養(yǎng)4d的小鼠原代背根神經(jīng)節(jié)(DRG)神經(jīng)元細(xì)胞作為研究對象，通過測定細(xì)胞相對活力、Caspase-3活性，以及細(xì)胞培養(yǎng)液中的乙酰膽堿、LDH和SOD的濃度，探討維生素C對硫酸黏桿菌素外周神經(jīng)毒

3、性是否具有頡頏作用。
　　 經(jīng)測定，硫酸黏桿菌素對DRG神經(jīng)元細(xì)胞活性的半數(shù)抑制濃度(IC50)為250μg·mL-1。將250μg·mL-1的黏桿菌素作為母液和對照組，利用母液配制不同維生素C濃度組的培養(yǎng)液，以維生素C終濃度為250、500、750、1000、1250μg·mL-1的培養(yǎng)液作為實(shí)驗(yàn)組，分別加入到培養(yǎng)4d的小鼠DRG細(xì)胞中，37℃，5％ CO2條件下培養(yǎng)24 h后觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，同時(shí)測定細(xì)胞相對活性值、Cas

4、pase-3活性，以及利用細(xì)胞上清液測定LDH水平、乙酰膽堿含量以及SOD活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:
　　 (1)當(dāng)維生素C濃度達(dá)到一定量（1000μg·mL-1）時(shí)，能夠很好的頡頏黏桿菌素對背根神經(jīng)形態(tài)學(xué)上的破壞。
　　 (2)維生素C可以降低細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH水平，有效地減小了黏桿菌素對細(xì)胞膜的破壞。
　　 (3)維生素C實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞相對活力、Caspase-3活性、乙酰膽堿活性、LDH和SOD活性都與對照組有著顯