上海地區(qū)加拿大一枝黃花根際及內(nèi)生熒光假單胞菌多樣性研究.pdf

1、生物入侵問題日益嚴(yán)重，不僅破壞了入侵地生態(tài)環(huán)境、危害當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)發(fā)展并嚴(yán)重威脅了人畜健康。目前加拿大一枝黃花在上海地區(qū)迅速蔓延，嚴(yán)重破壞了本地物種多樣性，影響了農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量。防治加拿大一枝黃花進(jìn)一步擴(kuò)張迫在眉睫。本文初步研究了加拿大一枝黃花內(nèi)生及根際熒光假單胞菌的多樣性，試圖找出熒光假單胞菌與入侵植物加拿大一枝黃花之間的關(guān)系，利用微生物與植物相互作用的規(guī)律，抑制加拿大一枝黃花等外來種的入侵，為微生物的環(huán)境修復(fù)做出貢獻(xiàn)。 本研究

2、通過對(duì)不同生長階段及上海不同區(qū)縣加拿大一枝黃花根際和內(nèi)生熒光假單胞菌的菌群數(shù)量變化的檢測，并對(duì)從中分離得到338株熒光假單胞菌進(jìn)行表型和遺傳型的分類，系統(tǒng)的研究了熒光假單胞菌的多樣性。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明；加拿大一枝黃花根際土和植株各器官中富集了大量產(chǎn)熒光的假單胞菌，且細(xì)菌數(shù)量隨著植株的生長逐漸增加，直到達(dá)到飽和狀態(tài)；不同地區(qū)加拿大一枝黃花根際及內(nèi)生產(chǎn)熒光的假單胞菌數(shù)量無明顯差異。 根據(jù)形態(tài)學(xué)特征及生理生化鑒定，對(duì)從加拿大一枝

3、黃花中分離到的熒光假單胞菌進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明：338個(gè)參試菌株涵蓋了熒光假單胞菌全部五個(gè)生物型，其中，40.53％的細(xì)菌屬于生物型I，所占比例最高；而生物型Ⅳ僅有兩株，占0.59％。生物型的分布雖然具有廣泛性但同時(shí)也與地理位置有一定的相關(guān)性。 為了進(jìn)一步研究熒光假單胞菌表型多樣性，對(duì)參試菌株蛋白多樣性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明；SDS-PAGE可以將參試的338株熒光假單胞菌分為68種SDS-PAGE類型，說明熒光假單胞菌具有豐富的

4、表型多樣性，且各類型菌株分布顯示出了一定的地域相關(guān)性和同源性；SDS-PAGE數(shù)值聚類分析結(jié)果顯示，在75％相似性水平上，熒光假單胞菌被分為8個(gè)群，各群中熒光假單胞菌的分布也顯示出一定的地理位置相關(guān)性。 16S-rDNA PCR-RFLP技術(shù)被用來研究熒光假單胞菌的遺傳多樣性。結(jié)果表明；內(nèi)切酶HaeⅢ和內(nèi)切酶HinfⅠ分別可將熒光假單胞菌分為7種和8種遺傳型，通過對(duì)數(shù)據(jù)的聚類分析，發(fā)現(xiàn)熒光假單胞菌在75％相似性水平上，可以被歸至