“天然植物抗菌液”鎮(zhèn)痛作用及機(jī)理研究.pdf

1、疼痛是一類發(fā)病機(jī)理復(fù)雜且嚴(yán)重危害人類身心健康的疾病，現(xiàn)有的鎮(zhèn)痛藥物大多具有耐受、成癮或損傷臟器等副作用;天然植物抗菌液（Natural plant antimicrobialsolution,PAMs）作為來源于天然植物藥的外用搽劑，具有無耐受、無成癮且少不良反應(yīng)等眾多優(yōu)勢，前期應(yīng)用實(shí)踐表明其具有抗炎鎮(zhèn)痛、消毒殺菌、抗腫瘤及促進(jìn)創(chuàng)口愈合組織新生等多種功效，具有良好的開發(fā)前景和研究意義。由于PAMs是中藥復(fù)方制劑，成分復(fù)雜不明，這對其各種

2、藥效發(fā)揮的機(jī)理研究有巨大影響，因此對其進(jìn)行有效成分的定性定量分析對于后續(xù)研究開發(fā)及該制劑本身的安全性評價和質(zhì)量控制十分重要。
　　本文首先采用火焰原子吸收分光光度法(FAAS)測定PAMs中重金屬和微量元素含量，結(jié)果顯示PAMs中不含重金屬元素鎳(Ni)、鉛(Pb)、鉻(Cr)、鎘(Cd)，而含銅(Cu)0.0185μg·mL-1、鐵(Fe)6.13μg·mL-1、鋅(Zn)0.56μg·mL-1，少量的Cu和豐富的Fe、Zn對人

3、體有益，且有助于該制劑藥效的發(fā)揮。其次采用高效液相色譜法（HPLC）對PAMs中部分有效成分進(jìn)行定性和定量分析，結(jié)果表明PAMs中含有尿囊素262.85μg/mL、羥基紅花黃色素A94.235μg/mL、龍血素A71.325μg/mL、烏頭堿9.11μg/mL。
　　本文利用小鼠甲醛致痛模型研究PAMs的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果表明:給藥時小鼠對于陽性對照藥物的抵抗行為明顯強(qiáng)于PAMs，說明PAMs對皮膚的刺激性弱于陽性藥物;在小鼠后足皮下

4、注射5％甲醛溶液后，0-5min及20-40min兩個時相內(nèi)，PAMs組的疼痛評分均明顯低于陰性組(P＜0.05)而高于陽性組(P＞0.05)，說明PAMs能一定程度上緩解急性疼痛和甲醛誘發(fā)的周圍炎性疼痛;血清疼痛相關(guān)因子檢測結(jié)果顯示PAMs和陽性藥物均能下調(diào)血清中的PGE2濃度(P＜0.05)并上調(diào)β內(nèi)啡肽含量(P＜0.05)，但陽性組的NO含量明顯低于陰性組而PAMs組則與陰性組無明顯差異，說明PAMs可通過抑制PGE2的合成和釋放

5、并上調(diào)β內(nèi)啡肽含量以達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。
　　利用Aβ25-35誘導(dǎo)PC12建立神經(jīng)細(xì)胞損傷模型以初步探究PAMs的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用，顯微觀察和MTT檢測結(jié)果表明1％、0.5％、0.25％的PAMs對PC12的正常生長無抑制作用;用Aβ25-35處理PC12細(xì)胞，顯微觀察結(jié)果顯示Aβ25-35會導(dǎo)致細(xì)胞聚團(tuán)并死亡。MTT和LDH檢測結(jié)果顯示模型組細(xì)胞活力明顯低于正常組(P＜0.05)且LDH含量顯著高于正常組(P＜0.05)，印證了顯微

6、觀察結(jié)果并表明建模成功;0.5％、0.25％的PAMs組和1％猴頭膠囊組細(xì)胞活力則顯著高于模型組(P＜0.05)且LDH含量低于模型組(P＜0.05)，說明0.5％、0.25％的PAMs和猴頭膠囊一樣能預(yù)防、緩解Aβ25-35所造成的氧化損傷;但1％PAMs組的LDH含量低于模型組，但其細(xì)胞活力明顯低于模型組(P＜0.01)外，說明1％的PAMs無法減輕Aβ25-35對細(xì)胞的氧化損傷。
　　主要結(jié)論:PAMs中不含重金屬元素鎳(N