陰溝腸桿菌w10j15中擬除蟲菊酯類殺蟲劑降解酶的酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、該文采用HP6890氣相色譜儀測(cè)定了聯(lián)苯菊酯,甲氰菊酯和氯氰菊酯在水體中的添加回收率,3種菊酯在水體中都分別設(shè)計(jì)了1mg/L,10mg/L,100mg/L3個(gè)不同濃度的添加回收試驗(yàn).結(jié)果表明,3種菊酯在水樣中的添加回收率在95.47％至103.21％之間,變異系數(shù)在2.21％-4.72％之間.從農(nóng)藥長(zhǎng)期污染的土樣中分離到—株陰溝腸桿菌w10j15,該菌株可以利用擬除蟲菊酯類殺蟲劑作為唯—碳源和能源進(jìn)行生長(zhǎng).經(jīng)研究表明(王兆守,2003)

2、,陰溝腸桿菌w10j15的生長(zhǎng)最適p H為7.0,最適溫度為30℃.該菌株培養(yǎng)72h,對(duì)50mg/L聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯的降解率分別為52.57％、50.13％和54.31％.在富集培養(yǎng)基培養(yǎng)72h后,可產(chǎn)生最高的聯(lián)苯菊酯降解酶活性,達(dá)到約8U/mL(U為每分鐘所降解的農(nóng)藥mg數(shù)).W10j15中提取的胞內(nèi)酶降解聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯和氯氰菊酯的最適反應(yīng)p H均為7.5,最適溫度均為40℃.該酶對(duì)聯(lián)苯菊酯的米氏常數(shù)Km=440.58

3、nmol/mL,最大反應(yīng)速率Vmax=50.25nmol/min;對(duì)甲氰菊酯的米氏常數(shù)Km=332.23nmol/mL,最大反應(yīng)速率Vmax=48.08nmol/min;對(duì)氯氰菊酯的米氏常數(shù)為Km=372.00nmol/mL,最大反應(yīng)速率Vmax=63.29nmol/min.該酶與底物作用20min,對(duì)濃度分別為50mg/L聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯的降解率分別為75％、58％、78％.該酶通過硫酸銨沉淀、凝膠過濾、離子交換柱層析等多