糖尿病大鼠痛覺(jué)減退與心肌缺血再灌注損傷易損性增加的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過(guò)分析降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）、P物質(zhì)（SP）在心肌，背根神經(jīng)節(jié)及血清的表達(dá)變化與糖尿病大鼠痛覺(jué)減退、心肌易損性增加的關(guān)系，探討痛覺(jué)減退與糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷易損性增加的相關(guān)性。
　　方法：⑴I型糖尿病大鼠模型的建立：200-250g雄性SD大鼠60只，腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozocin，STZ,50mg/kg)作為糖尿病組（DM組）。將注射STZ后一周內(nèi)血糖持續(xù)>16.7mmol/L為糖尿病造模成功

2、標(biāo)準(zhǔn)；同時(shí)喂養(yǎng)30只同周齡的正常大鼠作為對(duì)照，每周測(cè)量體重、血糖值、熱痛甩尾潛伏期（tail flick latency, TFL）；注射STZ第五周末采用ELISA法測(cè)定兩組大鼠血甘油三酯值并比較分析。⑵測(cè)量甩尾潛伏期及糖尿病分組：根據(jù)注射STZ后第5周末測(cè)得TFL值是否大于注射STZ前對(duì)照值的2倍，將糖尿病大鼠進(jìn)一步分為DM1組（TFL<對(duì)照值 x2）和DM2組（TFL>對(duì)照值 x2）。⑶測(cè)量、分析兩組糖尿病大鼠CGRP、SP變化：

3、采用免疫熒光技術(shù)和和ELISA法測(cè)定心肌、上胸段（T1-5）和腰骶背根神經(jīng)節(jié)（DRG）及血清CGRP，SP的含量：并觀察其在心肌處的含量分布。分析DM1組和DM2組上述測(cè)量值差異。⑷心肌梗死面積及心肌細(xì)胞凋亡的分析：采用TTC染色法、TUNEL分析凋亡試劑盒測(cè)定分析心肌梗死面積及心肌細(xì)胞凋亡程度，并分析DM1組和DM2組上述測(cè)量值差異。⑸測(cè)量、分析糖尿病大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）及辣椒素受體（TRPV1）：采用ELISA法和wester

4、n blot法分別定量分析缺血心肌NGF及TRPV1的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：①糖尿病組大鼠造模五周后，與對(duì)照組相比，體重發(fā)生顯著降低降低（P<0.01），而血糖在造模早期即升高至糖尿病水平（24h后），且甘油三酯亦出現(xiàn)顯著升高。②糖尿病組大鼠甩尾潛伏期逐漸延長(zhǎng)，至5w時(shí)有顯著性差異。與對(duì)照組相比， DM組的CGRP、SP在心肌、背根神經(jīng)節(jié)及血清處的含量均顯著下降（P<0.05），且DM2組中CGRP、SP含量顯著低于DM1組水平（

5、P<0.05）。③與I/R組正常大鼠相比，I/R組糖尿病大鼠心肌梗死面積顯著增加、心肌細(xì)胞凋亡比率均顯著升高（P<0.05）；DM組中，DM2組大鼠心肌缺血再灌注后，各項(xiàng)心肌損傷指標(biāo)均顯著高于DM1組。與相應(yīng)的假手術(shù)組比較，I/R組正常大鼠CGRP，SP顯著升高，I/R組糖尿病大鼠CGRP，SP升高不顯著。④與相應(yīng)的假手術(shù)組比較，正常大鼠I/R組缺血心肌處TRPV1表達(dá)顯著升高（P<0.05），糖尿病I/R組TRPV1表達(dá)變化不顯著，并

6、且顯著低于非糖尿病組（P<0.05），且DM1組和DM2組相比，缺血心肌處TRPV1表達(dá)無(wú)顯著差異。各組NGF含量變化：與相應(yīng)的假手術(shù)組比較，正常I/R組背根神經(jīng)節(jié)、缺血心肌及血清表達(dá)顯著升高（P<0.05），糖尿病I/R組NGF表達(dá)變化不顯著；與對(duì)照組相比，DM1組NGF含量顯著升高（P均<0.05），而DM2組NGF含量顯著下降（P<0.05）。
　　結(jié)論：⑴糖尿病組大鼠在注射STZ后痛覺(jué)逐漸減退，表現(xiàn)為甩尾潛伏期持續(xù)升高，而