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1、細(xì)胞微圖型化技術(shù)是一個(gè)多學(xué)科高度交叉的領(lǐng)域,它在許多方面有著重要的潛在應(yīng)用:第一,可應(yīng)用于大規(guī)模的藥物發(fā)現(xiàn)與篩選;第二,是細(xì)胞傳感器上用于固定細(xì)胞的一個(gè)重要手段;第三,是組織工程學(xué)的研究基礎(chǔ);第四,為分子細(xì)胞基礎(chǔ)生物學(xué)的研究提供另外一種方法。構(gòu)建細(xì)胞微圖案也是我課題組進(jìn)行細(xì)胞相關(guān)研究的基礎(chǔ)。 目前已經(jīng)發(fā)展了許多種細(xì)胞微圖案的制作方法。主要有光刻法、軟光刻法(包括微印章技術(shù)及微流體技術(shù))、“墨水”噴印技術(shù)、模板輔助圖案技術(shù)、激光誘
2、導(dǎo)直寫技術(shù)、電化學(xué)圖案化技術(shù)等。這些方法各有各的優(yōu)缺點(diǎn),但它們的制作均較為復(fù)雜,操作較為困難。 本論文主要是運(yùn)用光刻法及二氧化碳激光誘導(dǎo)法制作細(xì)胞微圖案,主要的研究?jī)?nèi)容及獲得的結(jié)果如下: 1.建立了以光刻法為基礎(chǔ)的細(xì)胞微圖案技術(shù),得到了蛋白質(zhì)微陣列及初步的細(xì)胞差異化圖案。 2.利用四氫鋁鋰對(duì)PMMA表面進(jìn)行化學(xué)活化,活化后的表面可以進(jìn)一步修飾各種分子基團(tuán),從而提高PMMA表面的可修飾性及細(xì)胞可貼附性。并用HeLa
3、細(xì)胞進(jìn)行了驗(yàn)證。 3.利用具有強(qiáng)氧化性的溴水誘導(dǎo)牛血清白蛋白變性,驗(yàn)證了牛血清白蛋白可抑制動(dòng)物細(xì)胞的非特異性粘附,而牛血清白蛋白變性后的表面則可進(jìn)行細(xì)胞粘附。 4.提出并建立了以二氧化碳激光誘導(dǎo)蛋白質(zhì)變性為基礎(chǔ)制作細(xì)胞微圖案技術(shù)。利用二氧化碳激光誘導(dǎo)自組裝在基底上的牛血清白蛋白變性,得到了變性/非變性的牛血清白蛋白微圖案,進(jìn)一步接種上HeLa細(xì)胞后可得到細(xì)胞微圖案。此法可以實(shí)現(xiàn)快速簡(jiǎn)便地制作復(fù)雜的細(xì)胞微圖案。若使用較小激
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