3cycTiN-Ti交替軟硬納米多層膜鍍膜的生物相容性研究.pdf

1、目的:
　　3cyc TiN/Ti交替軟硬納米復(fù)層鍍膜模具的生物相容性的基礎(chǔ)研究
　　方法:
　　細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)材料:3cyc TiN/Ti交替軟硬納米復(fù)層鍍膜滑動(dòng)螺釘模具材料消毒滅菌后，按5g/10ml加入無血清的DMEM培養(yǎng)液，于37℃在電熱恒溫培養(yǎng)箱中浸提72h。選用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的L929細(xì)胞，用細(xì)胞培養(yǎng)液配制成5×104個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。取96孔培養(yǎng)板，每孔加入100ul的細(xì)胞懸浮液。置于含5％二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)，

2、37℃下培養(yǎng)24h。細(xì)胞貼壁后，去上清，分別加入陰性、陽性對(duì)照液、100％、50％、25％濃度的試驗(yàn)樣品浸提液。培養(yǎng)24h，48h，72h后，依照比色實(shí)驗(yàn)操作方法依次加入MTT、DMSO，用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度，結(jié)果計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率(RGR)，依據(jù)RGR判定材料的細(xì)胞毒性。溶血實(shí)驗(yàn):材料消毒滅菌后，按5g/10ml加入生理鹽水注射液。分三組，每組3支試管，分別加入生理鹽水注射液、蒸餾水、浸提液。全部試管置恒溫水浴中保溫，每支試管中加入稀釋

3、兔血，繼續(xù)保溫，吸出管內(nèi)液體，離心后取上清液，測(cè)定其吸光度。急性毒性實(shí)驗(yàn):浸提液50ml/kg注射5只SD-大鼠的體內(nèi)，生理鹽水50ml/kg注射5只SD-大鼠的體內(nèi)，觀察動(dòng)物的生命體征及活動(dòng)進(jìn)食情況，并做病理切片。熱源性實(shí)驗(yàn):浸提液25 ml/kg注射5只SD-大鼠的體內(nèi)，生理鹽水50ml/kg注射5只SD-大鼠的體內(nèi)，測(cè)量注射前每只大鼠的體溫及注射后每隔1小時(shí)的體溫。
　　結(jié)果:
　　材料的細(xì)胞毒性為0級(jí)，溶血實(shí)驗(yàn)溶血率