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1、目的:觀察鹽霉素和索拉非尼聯(lián)用對(duì)體外培養(yǎng)的3種人類(lèi)腫瘤細(xì)胞增殖的影響,評(píng)價(jià)兩藥聯(lián)合使用的體外藥效;探究鹽霉素和索拉非尼聯(lián)用對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG-2裸鼠原位移植瘤生長(zhǎng)的抑制效應(yīng),初步評(píng)價(jià)其體內(nèi)藥效,為開(kāi)發(fā)應(yīng)用鹽霉素治療人類(lèi)惡性腫瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:①M(fèi)TT法檢測(cè)藥物對(duì)體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞(HepG-2、KCC853、A549)增殖的影響;實(shí)驗(yàn)分六組:空白對(duì)照組、鹽霉素組、索拉非尼組、鹽霉素聯(lián)合索拉非尼2:1組、鹽霉素聯(lián)合索拉非尼
2、1:1組、鹽霉素聯(lián)合索拉非尼1:2組;單用藥組設(shè)96、48、24、12、6、3、1.5、0.75、0.375、0.1875ug/ml十個(gè)濃度,聯(lián)合用藥組設(shè)置48、24、12、6、3、1.5、0.75、0.375、0.1875、0.09375ug/ml十個(gè)濃度按上述比例聯(lián)合使用。用酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)在570nm處各孔的OD值,數(shù)據(jù)整理、擬合即量效曲線及函數(shù)方程,根據(jù)Loewe等效線模型法合用指數(shù)公式CI= dADA+dBDB計(jì)算ED30、ED
3、50、ED70、 ED90的CI值,評(píng)估兩藥聯(lián)用的聯(lián)合效應(yīng)。②藥物治療人肝癌細(xì)胞HepG-2異種原位移植瘤模型;CMV包裝和感染HepG-2細(xì)胞,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞HepG-2-GFP-Luc,體外擴(kuò)增,制備成單細(xì)胞懸液,接種到雌性裸鼠前肢腋部皮下保種。選用18-22g BALB/c-nu雌性小鼠,用瘤塊移植法建立裸鼠肝原位移植瘤模型,根據(jù)Spectrum CT小鼠活體成像發(fā)光強(qiáng)度值和體重完全隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組、鹽霉素10mg/kg
4、組、索拉非尼10mg/kg組、鹽霉素+索拉非尼10mg/kg+10mg/kg組。鹽霉素和索拉非尼均采取灌胃給藥。給藥結(jié)束后處死裸鼠,取下肝臟和腫瘤,稱(chēng)重、拍照,依據(jù)瘤重的情況,判斷聯(lián)合用藥藥效。
結(jié)果:①設(shè)置的濃度區(qū)間覆蓋藥物效應(yīng)區(qū)間,鹽霉素與索拉非尼對(duì)腫瘤抑制作用強(qiáng)度相似,兩藥單用及不同固定比例合用時(shí)量效曲線為“S”型;兩種藥物固定比例聯(lián)合使用對(duì)不同細(xì)胞的抑制率分別為30%、50%、70%、90%時(shí)的聯(lián)合用藥效應(yīng),人腎癌細(xì)胞
5、 KCC853:鹽霉素與索拉非尼1:1合用時(shí)兩藥相互作用多為相加效應(yīng)或接近此效應(yīng),以其它兩種比例合用時(shí),兩藥相互作用多為拮抗效應(yīng);人肝癌細(xì)胞HepG-2:鹽霉素與索拉非尼1:2合用時(shí)兩藥相互作用多為相加效應(yīng)或接近此效應(yīng),其它兩種比例合用時(shí),兩藥相互作用多為拮抗效應(yīng)。人肺腺癌細(xì)胞 A549:三種比例合用多屬于相加和協(xié)同效應(yīng)。②鹽霉素與索拉非尼對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG-2肝原位移植瘤的抑制作用,鹽霉素組(10mg/kg)瘤重抑制率為44.5%(
6、P<0.05),索拉非尼組(10mg/kg)瘤重抑制率為48.3%(P<0.05),鹽霉素和索拉非尼合用組瘤重抑制率為69.1%(P<0.05)。
結(jié)論:①鹽霉素與索拉非尼對(duì)3種腫瘤細(xì)胞體外增殖的抑制強(qiáng)度相似;單用及不同固定比例合用可較強(qiáng)的抑制3種受試細(xì)胞的體外增殖;②鹽霉素與索拉非尼聯(lián)合使用對(duì)受試細(xì)胞體外增殖的抑制作用可發(fā)揮相加和協(xié)同效應(yīng),產(chǎn)生的聯(lián)合效應(yīng)與藥物濃度、藥物比例、受試細(xì)胞種類(lèi)有關(guān);③鹽霉素與索拉非尼對(duì)人肝癌細(xì)胞
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