紫錐菊多糖對大腸桿菌內(nèi)毒素的作用機理研究.pdf

1、紫錐菊屬(Echinacea Moenck)為多年生菊科草本野生花卉，雙子葉植物綱，具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒及抗癌等作用，為世界聞名的“免疫”草藥，該植物最早被北美印地安人用于各種感染、肺結(jié)核、昆蟲、蛇咬傷等。現(xiàn)在被廣泛用于免疫調(diào)節(jié)劑和免疫促進劑，內(nèi)毒素是大腸桿菌陰性菌細胞壁成分，也即脂多糖（lipopolysaccharide，LPS），它是細菌裂解死亡時釋放出來的，當機體病灶內(nèi)大量細菌死亡時，釋放大量的內(nèi)毒素入血，從

2、而導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥，誘導(dǎo)全身過度的炎癥反應(yīng)，造成機體細胞、組織器官損傷，甚至造成機體死亡。給人類造成危害。
　　本文實驗中，體外先研究紫錐菊多糖對LPS損傷后小腸上皮細胞株IEC-6的影響，采用MTT方法檢測IEC-6細胞的細胞增殖率;RT-PCR方法檢測IEC-6細胞分泌的細胞因子TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8mRNA表達水平;western blot方法檢測IEC-6細胞分泌的細胞因子NF-κB p65、pIκBα蛋

3、白表達水平;從而明確紫錐菊多糖對LPS作用后IEC-6細胞的作用機制。體內(nèi)再以脂多糖LPS誘導(dǎo)小鼠內(nèi)毒素損傷炎癥模型，通過ELISA方法檢測血清TNF-α、IL-1β、IL-6細胞因子的表達水平，石蠟切片檢測肺組織及干濕重檢測肺水腫的嚴重程度;實時熒光定量PCR方法檢測肺組織中COX-2、iNOS、HO-1、NF-κB mRNA表達水平，從而在實驗動物模型上研究紫錐菊多糖對內(nèi)毒素損傷的作用機制，進而明確紫錐菊多糖是否能為內(nèi)毒素損傷小鼠提

4、供保護作用。
　　研究結(jié)果顯示紫錐菊多糖預(yù)處理能增強LPS損傷后IEC-6細胞的增殖活性，對LPS損傷后IEC-6細胞分泌的因子TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-8的抑制作用具有濃度及時間依賴性，且能抑制NF-κB p65、pIκBα蛋白表達水平，從麗降低了LPS對IEC-6細胞的損傷，對細胞具有保護作用。紫錐菊多糖組也有效抑制了內(nèi)毒素損傷小鼠血清中細胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表達水平，及肺組織中炎癥因子COX-