肝癌術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移相關(guān)DNA拷貝數(shù)變異分子標(biāo)志初探.pdf

1、目的：
　　肝細胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是國內(nèi)常見的惡性腫瘤，手術(shù)仍是目前HCC的主要根治性治療方法，而術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移是患者預(yù)后差的一個重要因素。但目前對于具有何種分子特征的HCC易發(fā)生肝外轉(zhuǎn)移仍知之甚少，因此篩選HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)志具有重要意義。既往研究顯示DNA拷貝數(shù)變異（copy number aberrations, CNAs）與多種腫瘤進展和預(yù)后有關(guān)，且與HCC術(shù)后肝內(nèi)復(fù)

2、發(fā)相關(guān)，但CNAs與HCC術(shù)后遠處轉(zhuǎn)移的關(guān)系仍不清楚。本研究旨在探討HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移相關(guān)的CNAs分子標(biāo)志。
　　方法：
　　以66例HCC術(shù)后患者為研究對象，隨訪首次出現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移的時間，無肝外轉(zhuǎn)移生存時間定義為手術(shù)至出現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移或末次隨訪之時間間隔。采用高分辨率Agilent244K微陣列比較基因組雜交（array-based comparative genomic hybridization, aCGH）技術(shù)檢測HCC

3、組織基因組DNA的CNAs。采用Agilent G2565BA DNA微陣列掃描儀對雜交芯片進行掃描，運用Feature Extraction v9.5進行數(shù)據(jù)提取與分析。全基因組CNAs與HCC術(shù)后遠處轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析采用Cox風(fēng)險比例模型和Log-rank檢驗，以Kaplan-Meier繪制生存曲線。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。統(tǒng)計學(xué)分析采用Stata13.0統(tǒng)計學(xué)軟件包(Stata Corporation, College S

4、tation, TX)。
　　結(jié)果：
　　1.全組66例HCC樣本的術(shù)后隨訪時間為1.6～90.5個月，中位隨訪時間39.9個月，總隨訪時間2633.4人月，隨訪期間共有25例（37.9%）患者出現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移。
　　2.單因素Cox分析顯示，5個臨床病理學(xué)因素與HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（均P<0.05），其中高血壓史、無完整腫瘤包膜、高TNM分期（Ⅲ期）為危險因素，而低血小板計數(shù)（<100×109/L）和凝血酶原時間延

5、長（>12秒）為保護因素。
　　3.全基因組CNAs與HCC術(shù)后遠處轉(zhuǎn)移的單因素Cox分析顯示，5個CNAs片段是肝外轉(zhuǎn)移的顯著相關(guān)因素（均P<0.05），其中6p21.32增益、15q11.2增益和20q12-13.13增益是HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移的危險因素；4q12丟失和4q28.1-35.2丟失是轉(zhuǎn)移保護因素。
　　4. HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移相關(guān)因素的多元逐步 Cox回歸分析結(jié)果顯示，6p21.32增益、4q28.1-4q3

6、5.2缺失、高TNM分期（Ⅲ期）和高血壓史是HCC術(shù)后遠處轉(zhuǎn)移的獨立預(yù)后因素（均P<0.05），其中6p21.32增益、高TNM分期和高血壓史是轉(zhuǎn)移危險因素，而4q28.1-4q35.2缺失是轉(zhuǎn)移保護因素。
　　5. CNAs組合與HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移的相關(guān)性：依據(jù)6p21.32增益與4q28.1-35.2丟失狀態(tài)優(yōu)化組合，發(fā)現(xiàn)6p21.32增益、6p21.32無增益/4q28.1-35.2丟失和6p21.32無增益/4q28.1-

7、35.2無丟失3組 HCC的術(shù)后無肝外轉(zhuǎn)移生存差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Log-rank檢驗, P<0.01）；相比6p21.32無增益/4q28.1-35.2無丟失組，6p21.32無增益/4q28.1-35.2丟失組的肝外轉(zhuǎn)移風(fēng)險顯著降低至0.18倍（95%CI=0.06~0.57, P<0.01），而6p21.32增益組的肝外轉(zhuǎn)移風(fēng)險顯著增加至2.91倍（95% CI=1.13~7.46, P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1

8、．6p21.32增益、15q11.2增益和20q12-13.13增益是HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移的危險因素，而4q12丟失和4q28.1-35.2丟失是轉(zhuǎn)移保護因素。
　　2．6p21.32增益和4q28.1-35.2丟失是HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移的獨立預(yù)后因素，前者是轉(zhuǎn)移危險因素，后者是轉(zhuǎn)移保護因素。
　　3.基于6p21.32增益和4q28.1-35.2丟失2個獨立預(yù)后因素的CNAs優(yōu)化組合可在手術(shù)早期對HCC術(shù)后肝外轉(zhuǎn)移風(fēng)險作出預(yù)判