瞬時外向鉀通道開放劑NS5806對小鼠壓力負(fù)荷所致的心肌肥厚的影響.pdf

1、目的:心肌肥厚最突出的電生理改變是心室復(fù)極化延遲致動作電位時程(APD)延長，這種電重構(gòu)與心肌組織肥厚性重構(gòu)的關(guān)系目前尚不清楚。瞬時外向鉀電流(Ito)是動作電位早期復(fù)極化的主要外向電流，為嚙齒類動物的主要復(fù)極電流成份。本實驗觀察瞬時外向鉀通道開放劑NS5806對小鼠壓力負(fù)荷所致心肌肥厚的影響，以探討干預(yù)電重構(gòu)對組織肥厚性重構(gòu)的影響。
　　方法:建立主動脈弓部分狹窄法誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚模型;將小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham)、模型組

2、（TAB）;假手術(shù)組不進(jìn)行狹窄，其他步驟與模型組相同。術(shù)后3周用超高分辨率小動物超聲影像設(shè)備（M超）測定主動脈弓部分狹窄口的血流流速和心室壁厚度判斷造模情況;將模型組沒有狹窄確實的小鼠去除，隨后進(jìn)行隨機(jī)分組:模型對照組(TAB)和給藥組(NS5806)，其中給藥組又分為低、中、高劑量組(25，50和100 mg·kg-1)(LD、MD和HD)。腹腔注射給藥4周后，利用超聲心動（M超）圖評價心功能變化;記錄小鼠麻醉狀態(tài)下的心電圖;測定心臟

3、重量指數(shù)(LVW/BW);取心臟標(biāo)本進(jìn)行HE染色及Masson染色;采用實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測心肌肥厚組織纖維化相關(guān)mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果:①術(shù)后3周M超檢測結(jié)果顯示，手術(shù)組與sham組相比較，超聲心動多普勒檢測主動脈弓狹窄處血流流速明顯增高(P＜0.01)，手術(shù)組較sham組相比左心室腔明顯減小，室壁厚度明顯增加，收縮期左室內(nèi)徑縮小(P均＜0.05或＜0.01），射血分?jǐn)?shù)，短軸縮短率明顯減小(P＜0.01)，

4、手術(shù)組左心室重量指數(shù)明顯大于sham組（P＜0.01），上述結(jié)果表明，主動脈弓狹窄手術(shù)已造成病理性肥厚。②給藥4周后通過M超檢測結(jié)果表明NS5806能夠改善心功能，一定程度上逆轉(zhuǎn)心肌肥厚表現(xiàn)為:與TAB組相比，給藥組左心室腔室增大，室壁變薄(P＜0.01），心肌心臟泵血功能即射血分?jǐn)?shù)增加(P＜0.01);并且隨低、中、高給藥劑量的遞增改善效果越顯著(P均＜0.05或＜0.01）。③與sham組相比TAB組由于壓力超負(fù)荷導(dǎo)致的心肌肥厚使在

5、心電圖上表現(xiàn)為QT間期延長，J點下降(P均＜0.05或＜0.01)，部分動物伴有T波倒置;與TAB組相比給藥組J點上升明顯(P＜0.01)，并能夠觀察到QT間期縮短(P＜0.01），并存在劑量依賴性縮短，而QRS波群和RR間期沒有明顯的變化，提示NS5806給藥能夠縮短心肌動作電位時程。④與sham組相比模型組左、右心室重量指數(shù)都有增加(P均＜0.05或＜0.01）;給藥治療后，左室改善效果顯著(P＜0.01），右室重量雖有降低的趨勢但

6、是沒有顯著差異，提示藥物顯著改善左室肥厚。⑤組織病理結(jié)果顯示，HE染色:與sham組相比TAB組心肌細(xì)胞截面面積比值明顯增加(P＜0.01); Masson染色結(jié)果顯示心肌間質(zhì)膠原增生明顯（P＜0.01），NS5806治療后TAB小鼠心肌組織間質(zhì)膠原明顯減少(P＜0.01），且心肌細(xì)胞形態(tài)大小得到改善，提示給藥組心肌肥厚的病理特征得以逆轉(zhuǎn)。⑥RT-PCR實驗結(jié)果顯示與假手術(shù)組相比模型組肥厚相關(guān)標(biāo)志物ANP、β-MHC及心肌纖維化Proc