抑癌基因P16甲基化與血管內(nèi)皮生長因子VEGF-C在舌癌淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制中的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:本試驗(yàn)通過檢測抑癌基因P16甲基化程度及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF-C)在舌鱗癌組織中的表達(dá)，研究舌癌淋巴轉(zhuǎn)移機(jī)制中兩者的相關(guān)性及作用，為舌癌易感人群的早期診斷及降低淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率提高預(yù)后提供理論依據(jù)。
　　方法:運(yùn)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)及免疫組化技術(shù)，分別檢測30例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌組織（實(shí)驗(yàn)組）和30例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌組織（對照組），研究抑癌基因P16啟動子區(qū)域的甲基化程度及P16蛋白與VEGF-C的表達(dá)情況，并結(jié)合臨

2、床病理資料（性別、年齡、腫瘤侵犯部位、組織病理分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素）進(jìn)行分析，旨在探索舌癌淋巴轉(zhuǎn)移的過程中抑癌基因P16甲基化程度與VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性。
　　結(jié)果:熒光甲基化特異聚合酶鏈反應(yīng)Q-MSP部分:實(shí)驗(yàn)組30例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌組織，通過Q-MSP定性檢測，使用甲基化引物序列，檢測出合理P16 CPG島甲基化擴(kuò)增圖形，CP值在20-30之間，甲基化陽性率為76.66％(23/30)，對照組為30例未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

3、移舌癌組織，使用同樣甲基化引物序列進(jìn)行檢測，P16甲基化陽性率為36.66％(11/30)，實(shí)驗(yàn)組及對照組兩者數(shù)據(jù)比較差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);同時(shí)使用非甲基化引物序列參與，實(shí)驗(yàn)組30例舌癌組織獲得擴(kuò)增圖形63.33％(19/30)，對照組獲得合理擴(kuò)增圖形為26.66％(8/30)，CP值在20-30之間，實(shí)驗(yàn)組及對照組兩者數(shù)據(jù)比較差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　免疫組化實(shí)驗(yàn)部分:實(shí)驗(yàn)組中P16甲基

4、化陽性率為76.66％(23/30)，P16蛋白表達(dá)率為20％(6/30);對照組中P16甲基化陽性率為36.66％(11/30)，P16蛋白表達(dá)率56.66％(17/30)，二者之間差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。通過phi相關(guān)系數(shù)計(jì)算P16甲基化和P16蛋白表達(dá)之間的關(guān)系，得出結(jié)果r=0.7841，說明P16基因甲基化與P16蛋白具有強(qiáng)相關(guān)性;實(shí)驗(yàn)組中VEGF-C陽性表達(dá)率為70％(21/30)，在30例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌中V

5、EGF-C陽性表達(dá)為（-）4例、(+)11例、(++)15例;對照組中VEGF-C陽性表達(dá)率為23.33％(7/30)，在30例無淋巴轉(zhuǎn)移舌癌組織中VEGF-C陽性表達(dá)為（-）23例、(+)3例、(++)4例，明顯低于實(shí)驗(yàn)組，因此VEGF-C陽性表達(dá)率在舌癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織之間差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　不同性別、年齡及腫瘤侵犯部位的舌癌組織中p16基因甲基化表達(dá)程度沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，

6、不同組織學(xué)分化程度、有無淋巴轉(zhuǎn)移的舌癌組織中p16基因甲基化表達(dá)程度具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);不同性別、年齡、腫瘤侵犯部位及分化程度的舌癌組織中VEGF-C的表達(dá)率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的舌癌組織中VEGF-C的表達(dá)率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組中P16蛋白表達(dá)率為20.00％(6/30)，VEGF-C陽性表達(dá)率為70.00％(21/30)，通過統(tǒng)計(jì)學(xué)phi相關(guān)系數(shù)計(jì)算實(shí)驗(yàn)組舌癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中P

7、16基因蛋白表達(dá)和VEGF-C的表達(dá)相關(guān)性，得出結(jié)果r=0.5749，而P16基因甲基化與P16蛋白失活存在強(qiáng)相關(guān)性，間接證實(shí)P16基因甲基化和VEGF-C在舌癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機(jī)制中具有中度相關(guān)性。
　　結(jié)論:1、P16甲基化及VEGF-C的表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤侵犯部位等臨床病理因素?zé)o明顯相關(guān)性，與癌組織分化程度、是否有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素密切相關(guān);
　　2、P16甲基化程度與P16蛋白表達(dá)具有強(qiáng)相關(guān)性，P16甲基化是導(dǎo)致腫