柿葉藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及有效部位制備工藝研究.pdf

1、缺血性中風(fēng)是由腦血流供應(yīng)障礙引起缺血(氧)、局限性腦缺血性壞死或腦軟化的疾病，其中缺血性中風(fēng)患者約占各種中風(fēng)患者的43％～65％。柿葉為柿樹科柿樹屬植物柿(Diospyros kaki Thunb.)的葉，性味苦，酸，澀，涼，含有黃酮、酚酸、三萜、香豆素等多種化學(xué)成分，可用于缺血性中風(fēng)的治療。目前通過民間驗(yàn)方制成的柿葉制劑對(duì)缺血性中風(fēng)具有很好的療效，安全性較高，但由于該制劑是上個(gè)世紀(jì)80年代研制、近年來才上市的中藥品種，生產(chǎn)工藝落后，技

2、術(shù)水平低下，在國際市場上缺乏競爭力，同時(shí)治療缺血性中風(fēng)藥效成分尚不清楚。為此，本研究對(duì)其治療缺血性性中風(fēng)的有效部位進(jìn)行了藥效篩選研究，并對(duì)有效部位的制備工藝進(jìn)行研究。旨在開發(fā)出治療缺血性中風(fēng)的中藥五類新藥。具體研究工作如下：
　　1.藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究：
　　本研究首次以金絲桃苷、異槲皮苷為指標(biāo)成分，建立了柿葉藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，建立方法具有分離效果好，靈敏，準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，可作為柿葉藥材含量測定的方法。
　　2.柿葉治療缺

3、血性中風(fēng)有效部位的篩選
　　采用70%乙醇提取得到柿葉提取液，減壓濃縮得無醇水液，采用三氯甲烷萃取得到三氯甲烷層和水層，三氯甲烷層濃縮，通過凝膠樹脂純化得總?cè)撇课?，水層通過AB-8大孔樹脂水-乙醇梯度洗脫，通過指紋圖譜檢測各流份，制備得到總酚酸、總黃酮以及其他成分幾個(gè)部位。對(duì)不同部位進(jìn)行藥效篩選，以運(yùn)動(dòng)評(píng)分、抓力、腦水腫、腦梗死、MDA、SOD六項(xiàng)指標(biāo)評(píng)價(jià)柿葉有效部位的強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明柿葉總黃酮部位為治療缺血性中風(fēng)的有效部位。

4、
　　3.提取工藝研究
　　采用HPLC法，以槲皮素、山奈酚的平均轉(zhuǎn)移率和出膏率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)溶劑(A)、提取時(shí)間(B)、提取次數(shù)(C)三個(gè)因素進(jìn)行了考察，采用L9(34)正交試驗(yàn)表安排實(shí)驗(yàn)，綜合評(píng)分，對(duì)柿葉總黃酮的提取工藝進(jìn)行了研究，確定柿葉的最佳提取工藝。
　　4.純化工藝研究
　　對(duì)柿葉總黃酮部位純化工藝進(jìn)行了研究?？疾鞚饪s倍數(shù)，pH對(duì)柿葉初步純化的影響，通過對(duì)不同型號(hào)的大孔吸附樹脂進(jìn)行篩選，優(yōu)選DM-13