常見薊馬的分子鑒定及中國3地區(qū)西花薊馬遺傳差異分析.pdf

1、薊馬屬于纓翅目，全世界大約有5500種，其中有記載的對農(nóng)作物造成嚴(yán)重危害的薊馬僅占薊馬總數(shù)的1％。薊馬一般個體微小(<2mm)，適生性強(qiáng)，繁殖率高，為害時隱藏于植物的各個部位，危害初期常不易被人發(fā)現(xiàn)，直到被危害作物顯現(xiàn)出被害癥狀后才引起人們注意。某些薊馬還可以傳播植物病毒，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來更為嚴(yán)重的損失。傳統(tǒng)的薊馬鑒定工作費(fèi)時費(fèi)力，尤其是薊馬在幼蟲，蠕蟲，及蛹期不容易通過形態(tài)特征被鑒定出來。這些都給鑒定工作增加了困難，容易導(dǎo)致鑒定錯誤。這

2、對植物檢疫和綜合防治都不利。 基于PCR技術(shù)的分子鑒定為物種的鑒定提供了新的手段，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)形態(tài)鑒定的諸多不足，可以檢測物種間及同種個體間的細(xì)微差別。近年來，外來薊馬物種的入侵使得準(zhǔn)確快速地鑒定薊馬成為迫切需要解決的問題。本研究第一部分用PCR產(chǎn)物直接測序法對入侵害蟲西花薊馬和其他8種薊馬的線粒體基因COI 433 bp片段測序，獲得62個個體的序列。分子數(shù)據(jù)分析顯示：種內(nèi)個體間平均遺傳距離在0～0.005之間，2003年在北京

3、發(fā)現(xiàn)的西花薊馬與歐洲等地區(qū)報導(dǎo)的西花薊馬不存在明顯的遺傳差異；9種薊馬種間平均遺傳距離為0.213。構(gòu)建的NJ樹可以很好的顯示薊馬的聚類，物種各單元型最初分支自展值均達(dá)到100％。結(jié)果表明，基于PCR及直接測序技術(shù)的分子鑒定可以達(dá)到準(zhǔn)確鑒定薊馬物種之目的。本研究還根據(jù)實驗得到的分子數(shù)據(jù)，以及從NCBI上搜索得到的相關(guān)數(shù)據(jù)，對薊馬的分子系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進(jìn)行了分析，分析結(jié)果表明，基于線粒體COI部分片段構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹，可以很好地對薊馬進(jìn)行聚類

4、，但對于準(zhǔn)確確定某些種的系統(tǒng)發(fā)育地位還存在偏差。 本研究第二部分用PCR擴(kuò)增了分別在中國云南、山東泰安、北京采集到的西花薊馬COI 433bp片段和ITS2部分片段，分析了這三地西花薊馬的遺傳差異，結(jié)果顯示，這3地采集到的西花薊馬從COI序列上顯示遺傳差異，而在ITS2則差異不明顯。 為了更快速地鑒定入侵害蟲西花薊馬，根據(jù)對3種花薊馬屬薊馬的ITS2序列比對分析設(shè)計出對西花薊馬的特異引物，該特異引物經(jīng)驗證對西花薊馬特異，