針刺調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶網(wǎng)絡(luò)延長(zhǎng)腦梗死溶栓時(shí)間窗的研究.pdf

1、目的:觀察醒腦開(kāi)竅針刺法延長(zhǎng)腦梗死溶栓時(shí)間窗的效應(yīng);探討醒腦開(kāi)竅針刺法對(duì)缺血再灌注損傷的腦保護(hù)作用的可能機(jī)制。
　　方法:將SD大鼠分為假手術(shù)組、模型組、溶栓組、針刺+溶栓組（針刺組）、藥物+溶栓組（對(duì)照組），以自體血栓栓塞法制作局灶性腦缺血大鼠模型，rt-PA為溶栓手段，以“醒腦開(kāi)竅”針刺法為干預(yù)手段，觀察針刺干預(yù)對(duì)大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、腦梗死容積百分比、腦含水量、腦出血量以及血腦屏障通透性的影響;在此基礎(chǔ)上，同時(shí)運(yùn)用Real-t

2、ime PCR和Western blot方法分別檢測(cè)各組大鼠皮層中炎性因子TNF-α、IL-1β、ICAM-1的mRNA及蛋白表達(dá)情況;并運(yùn)用明膠酶譜法檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性變化，最后運(yùn)用Western blot方法檢測(cè)緊密連接相關(guān)蛋白ZO-1、occludin的表達(dá)，以探討針刺調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶網(wǎng)絡(luò)的作用機(jī)制。
　　結(jié)果:1、針刺延長(zhǎng)腦梗死溶栓時(shí)間窗的效應(yīng)研究
　　溶栓治療后腦梗死大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、腦含水量、腦出

3、血量以及血腦屏障通透性隨著溶栓時(shí)間的延長(zhǎng)而增加(P＜0.05);溶栓治療后腦梗死容積百分比與治療前相比并無(wú)明顯變化(P＞0.05);針刺以及抑制劑干預(yù)均能降低神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，減少腦梗死體積、腦含水量以及腦出血量，穩(wěn)定血腦屏障通透性(P＜0.05);相比抑制劑，針刺在降低神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、減少腦出血量以及穩(wěn)定血腦屏障通透性上更具優(yōu)勢(shì)(P＜0.05);在減少腦梗死體積以及腦含水量上兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2、針刺延長(zhǎng)腦梗

4、死溶栓時(shí)間窗的機(jī)制研究
　　(1)炎性因子的mRNA及蛋白表達(dá):溶栓治療后腦梗死大鼠TNF-α、IL-1β以及ICAM-1的mRNA及蛋白表達(dá)均升高(P＜0.05);針刺和抑制劑干預(yù)均能降低這三種炎性因子的mRNA及蛋白表達(dá)(P＜0.05);相比抑制劑，針刺在降低ICAM-1的mRNA及蛋白表達(dá)上更具優(yōu)勢(shì)(P＜0.05);而在降低TNF-α、IL-1β的mRNA及蛋白表達(dá)上二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　(2)基質(zhì)金

5、屬蛋白酶活性:溶栓前后比較MMP-2和MMP-9差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);針刺和抑制劑能降低溶栓后MMP-9活性，且針刺效應(yīng)大于抑制劑效應(yīng)(P＜0.05);針刺和抑制劑在降低MMP-2活性上與溶栓組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)
　　(3)緊密連接蛋白表達(dá):溶栓治療后腦梗死大鼠ZO-1和occludin的蛋白表達(dá)隨著溶栓時(shí)間的延長(zhǎng)而降低(P＜0.05);針刺和抑制劑均能提高溶栓后腦梗死大鼠ZO-1和occludin

6、的蛋白表達(dá)(P＜0.05);相比抑制劑，針刺提高溶栓后腦梗死大鼠ZO-1和occludin的蛋白表達(dá)更為顯著（P＜0.05）。
　　結(jié)論:大鼠腦缺血后溶栓治療受到時(shí)間窗的嚴(yán)格限制，超過(guò)時(shí)間窗溶栓會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)功能損傷、血腦屏障改變以及出血性轉(zhuǎn)化，且這些影響隨著溶栓時(shí)間的延長(zhǎng)而加重。醒腦開(kāi)竅針刺法和MMPs廣譜抑制劑強(qiáng)力霉素均可通過(guò)改善腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能損傷、減少溶栓治療后血腦屏障通透性改變以及出血性轉(zhuǎn)化來(lái)實(shí)現(xiàn)延長(zhǎng)腦梗死溶栓時(shí)間窗