RORγt、Foxp3、IL-17和IL-35在玫瑰糠疹患者外周血中的表達(dá)及意義.pdf

1、玫瑰糠疹（Pityriasis Rosea,PR）是一種急性炎癥性自限性皮膚病。典型表現(xiàn)是位于四肢近端及軀干的圓形或橢圓形的玫瑰色斑疹或斑丘疹，表面覆有領(lǐng)圈狀細(xì)薄鱗屑，皮損長(zhǎng)軸常與皮膚紋理方向平行。易發(fā)病于青少年及青年人，春秋季多見。常伴有不同程度的瘙癢，常常影響休息與工作。本病的病因和發(fā)病機(jī)制不明，多認(rèn)為與病毒（HHV-6、HHV-7）感染后誘發(fā)的細(xì)胞免疫失衡有關(guān)。
　　Th17細(xì)胞具有促進(jìn)免疫炎癥的作用，通過分泌炎性因子 IL

2、-17等參與了機(jī)體多種炎性疾病的發(fā)生和發(fā)展。RORγt是Th17細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子。Treg細(xì)胞是一類在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)、維持免疫平衡方面具有重要作用的Th細(xì)胞亞群，其表達(dá)特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3，分泌IL-10、IL-35和TGF-β等細(xì)胞因子。研究發(fā)現(xiàn)，IL-35可能是促使Treg細(xì)胞發(fā)揮最大免疫抑制作用的細(xì)胞因子。
　　Th17和Treg細(xì)胞均由初始CD4+T細(xì)胞分化而來。兩者不僅在功能上相互拮抗，而且其分化過程也相互拮抗

3、。正常情況下，兩者保持相對(duì)平衡。Th17/Treg細(xì)胞保持平衡有助于機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)的維持。既往研究發(fā)現(xiàn)，在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、過敏性紫癜、特應(yīng)性皮炎等發(fā)病過程中，機(jī)體存在Th17、Treg細(xì)胞比例失衡。但在PR的發(fā)病中，Th17、Treg細(xì)胞發(fā)揮著怎樣的作用，機(jī)體是否存在著Th17、Treg細(xì)胞比例失衡，目前鮮有報(bào)道。
　　目的：
　　①采用RT-PCR檢測(cè)PR患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子RORγt、Foxp3表達(dá)，采用ELIS

4、A檢測(cè)PR血清中IL-17、IL-35水平，探討Th17和Treg細(xì)胞在玫瑰糠疹發(fā)病中的作用；
　?、谔接戅D(zhuǎn)錄因子RORγt、細(xì)胞因子IL-17與玫瑰糠疹嚴(yán)重程度評(píng)分（PRSS）、玫瑰糠疹病程、NB-UVB治療次數(shù)的相關(guān)性。
　　對(duì)象與方法：
　　收集2015年1月至2015年6月在我院皮膚科門診就診的玫瑰糠疹患者。入選標(biāo)準(zhǔn)：①有典型的臨床表現(xiàn)（位于四肢近端及軀干的圓形或橢圓形的玫瑰色斑疹或斑丘疹，表面覆有領(lǐng)圈狀細(xì)薄鱗

5、屑，皮損長(zhǎng)軸常與皮膚紋理方向平行）；②發(fā)病2～10d。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重心腦血管、肝臟、腎臟等疾病者；②哺乳期或妊娠期婦女；③伴有紅斑狼瘡、天皰瘡、皮肌炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、過敏性疾病、腫瘤及其他嚴(yán)重系統(tǒng)疾患者；④對(duì)紫外線過敏史者；⑤1月內(nèi)口服或注射過抗組胺藥、免疫抑制劑以及類固醇激素者；⑥梅毒血清實(shí)驗(yàn)陽性者。共收集玫瑰糠疹急性期患者20例，其中男9例，女11例，年齡19～48（33.52±14.12）歲。對(duì)照組為20例本院健康體檢者，其

6、中男12例，女8例，年齡18～44（31.34±13.31）歲。兩組間性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。于清晨空腹抽取靜脈血?；謴?fù)期組為急性期玫瑰糠疹患者經(jīng)NB-UVB治療后皮疹消退者，記錄玫瑰糠疹患者病程（31.56±19.25）d和NB-UVB治療的次數(shù)（10.5±6.1）次，于治療結(jié)束1周后再次采集靜脈血。采用熒光實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)玫瑰糠疹患者急性期、恢復(fù)期和對(duì)照組外周血轉(zhuǎn)錄因子RORγt、

7、Foxp3表達(dá)水平；采用雙夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清中IL-17、IL-35水平。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，定量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（-x±s)表示；兩組定量資料的比較，符合正態(tài)分布且方差齊時(shí)采用t檢驗(yàn)，方差不齊的采用t，檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。
　　結(jié)果：
　?、偌毙云?、恢復(fù)期、對(duì)照組外周血轉(zhuǎn)錄因子RORγt的表達(dá)水平分別是4.61±4.40、1.99

8、±1.44、0.60±0.25；血清 IL-17水平分別是(26.77±13.08)、(18.25±5.78)、(10.89±2.33)pg/ml。急性期RORγt、IL-17水平均明顯高于恢復(fù)期（t=8.176，P＜0.01；t=11.542，P＜0.01），恢復(fù)期均高于對(duì)照組（t，=5.687，P＜0.05；t=5.860，P＜0.05）。
　　②急性期、恢復(fù)期、對(duì)照組外周血轉(zhuǎn)錄因子 Foxp3的表達(dá)水平分別是1.89±1.5

9、3、2.43±1.72、0.74±0.24；血清 IL-35水平分別是(100.41±17.17)、(125.75±24.57)、(65.26±12.07)pg/ml。恢復(fù)期Foxp3、IL-35水平均高于急性期，但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.472，P﹥0.05；t=1.861，P﹥0.05）；急性期Foxp3、IL-35水平均明顯高于對(duì)照組（t=6.395，P＜0.05；t=7.557，P＜0.05）。
　?、奂毙云?、恢復(fù)期、對(duì)照

10、組外周血轉(zhuǎn)錄因子RORγt、Foxp3表達(dá)水平的比值RORγt/Foxp3分別是2.31±0.90、0.83±0.22、0.86±0.40。急性期RORγt/Foxp3高于恢復(fù)期和對(duì)照組（t=17.454，P＜0.01；t=17.180，P＜0.01），恢復(fù)期與對(duì)照組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.033，P﹥0.05）。
　　④玫瑰糠疹急性期患者外周血轉(zhuǎn)錄因子RORγt與Foxp3的表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.739，P＜0.05）；

11、血清中IL-17水平與IL-35呈負(fù)相關(guān)（r=-0.484，P＜0.05）。
　?、菝倒蹇氛罴毙云诨颊逺ORγt、IL-17水平與PRSS（18.33±7.56）均呈正相關(guān)（r=0.834，P＜0.05；r=0.822，P＜0.05），與玫瑰糠疹病程（31.56±19.25）d均呈正相關(guān)（r=0.819，P＜0.05；r=0.731，P＜0.05），與 NB-UVB治療次數(shù)（10.5±6.1）均呈正相關(guān)（r=0.753，P＜0.0