基于調和肝脾法探討加味柴芍六君顆粒治療UC臨床及機制研究.pdf

1、目的:
　　李桂賢教授根據(jù)潰瘍性結腸炎大便溏爛，便次增多，大便夾有粘液、血液等主要臨床表現(xiàn)把之歸屬于泄瀉、下利、痢疾、腸風、臟毒、大瘕泄等病范疇，其病機脾虛為其根本，肝脾不和是關鍵，濕熱為主要病理因素，氣滯血瘀貫穿在疾病的整個過程。李桂賢教授在臨床中發(fā)現(xiàn)，肝郁脾虛型的潰瘍性結腸炎最為常見，因此，李桂賢教授根據(jù)此現(xiàn)實情況常采用加味柴芍六君顆粒治療潰瘍性結腸炎。加味柴芍六君顆粒由四逆散和六君子湯化裁而成，取兩者合用以疏肝健脾，加味柴芍

2、六君顆粒加入白花蛇舌草、鳳尾草清熱利濕止瀉，三七活血祛瘀，合陳皮行氣止痛，寓“行血則便膿自愈，調氣則后重自除”之意，同為佐使藥;甘草調和諸藥為使藥。諸藥合用，共奏疏肝解郁、理氣健脾、清熱利濕止瀉、活血祛瘀之功。
　　本課題在前期研究的基礎上，系統(tǒng)整理李桂賢教授的學術思想和治療UC的臨床經(jīng)驗;采用隨機、對照方法，基于治療前、后結腸鏡下黏膜愈合質量、中醫(yī)證候學指標、生存質量及血清NF-KBp50、CRP表達變化，主客觀指標合參，客觀評

3、價加味柴芍六君顆粒防治潰瘍性結腸炎的臨床效用及其可能機制;從潰瘍性結腸炎大鼠組織形態(tài)學及TLR-4/NF-KB信號通路中相關指標變化，探討加味柴芍六君顆粒干預潰瘍性結腸炎的效應及其可能機制。
　　方法:
　　本課題分為系統(tǒng)整理李桂賢教授的學術思想和治療UC的臨床經(jīng)驗、臨床研究和實驗研究三部分。
　　臨床研究方法:應用前瞻性、非劣效設計原則，采用隨機、對照方法，將符合診斷標準、納入標注及排除標準的60例潰瘍性結腸炎患者按

4、就診順序隨機1∶1分為兩組，即治療組和對照組。治療組予加味柴芍六君顆粒干預12周，對照組予美沙拉嗪干預12周。詳細記錄治療前、后中醫(yī)證侯學計分、腸鏡及生存質量變化，應用ELISA法檢測治療前、后NF-KBp50、CRP表達變化?；陴つび腺|量、主要癥狀計分及生存質量（漢密爾頓焦慮及抑郁量表評分）等變化，多角度評估加味柴芍六君顆粒干預潰瘍性結腸炎的效用。
　　實驗研究方法:180只清潔級SD大鼠，按體質量隨機分為6組，每組30只，

5、即正常組、模型組、對照組及治療組（低劑量、中劑量及高劑量組）。除正常組外，均應用TNBS灌腸法制備潰結模型，自第4d起分組給藥，模型組予等劑量生理鹽水、對照組予美沙拉嗪、治療組予不同劑量加味柴芍六君顆粒，連續(xù)給藥1周。末次給藥后處死全部大鼠，應用光鏡檢測大鼠腸道組織病理學，應用Real-time PCR、免疫組化技術檢測TLR-4、NF-K Bp65表達變化。
　　結果:
　　1.臨床研究結果基于治療前、后腸鏡變化判定療效判

6、定:全部患者均完成臨床觀察，無病例脫落和中止。其中治療組臨床痊愈5例，顯效8例，好轉10例，無效7例，總有效率為76.66％;對照組臨床完全緩解3例，顯效7例，好轉11例，無效9例，總有效率為70％。經(jīng)統(tǒng)計學分析，療效相似(P＞0.05)?；诎Y狀積分判定療效:治療組臨床完全緩解6例，顯效7例，好轉12例，無效5例，總有效率為83.33％;對照組臨床完全緩解4例，顯效6例，好轉10例，無效10例，總有效率為66.66％。經(jīng)統(tǒng)計學分析，治

7、療組優(yōu)于對照組。經(jīng)統(tǒng)計學分析，治療組優(yōu)于對照組(P＜0.05)。漢密爾頓生存質量量表評估療效:治療組臨床完全緩解7例，顯效8例，好轉11例，無效4例，總有效率為86.66％;對照組臨床完全緩解4例，顯效5例，好轉12例，無效9例，總有效率為70％。經(jīng)統(tǒng)計學分析，治療組優(yōu)于對照組。經(jīng)統(tǒng)計學分析，治療組優(yōu)于對照組(P＜0.05)。治療前，兩組患者臨床癥狀比較，無統(tǒng)計學意義，具有可比性;治療4wk后，兩組患者便血、腹痛、腹瀉等癥狀較治療前無明

8、顯改善;治療8wk后，兩組患者便血、腹痛、腹瀉等癥狀較治療前均有不同程度改善，與治療前比較，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。治療后12wk，兩組患者上述癥狀積分較治療前有明顯改善，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。治療后12wk，兩組患者癥狀積分之間比較，治療組優(yōu)于對照組。治療后兩組患者NF-KBp50及CRP水平均較治療前下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。治療前，兩組患者存在不同程度焦慮/抑郁

9、現(xiàn)象，經(jīng)比較無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，具有可比性;治療后，兩組患者焦慮/抑郁在伴隨臨床癥狀改善同時，積分比較亦呈同步變化趨勢，較治療前有明顯好轉(P＜0.05);治療后，治療組焦慮/抑郁改善明顯優(yōu)于對照組(P＜0.05)。
　　2.3.實驗研究結果肉眼見正常組結腸黏膜未見病理變化;模型組結腸黏膜充血、腫脹，糜爛明顯，有壞死物及白色苔樣附著，潰瘍多而且大;各治療組結腸黏膜充血腫脹減輕，糜爛少，未見白色苔樣物附著，未見明顯潰瘍;對

10、照組結腸黏膜充血、腫脹較模型組減輕，潰瘍散在發(fā)生，未見苔樣物附著。光鏡下見正常組結腸黏膜形態(tài)正常;模型組黏膜層見一較大潰瘍，潰瘍表面有滲出壞死層，其下可見少量幼稚肉芽組織，潰瘍周圍的腺體擴張，腺上皮細胞輕度增生，腸壁各層充滿浸潤的炎細胞。各治療組見結腸壁黏膜及黏膜下層充血，水腫，炎性細胞浸潤，及成纖維母細胞增加，見2例樣本有小潰瘍形成。對照組見結腸黏膜愈合性小潰瘍，腸壁各層充血、水腫，炎性細胞浸潤，有4例樣本見較大潰瘍，潰瘍深達淺肌層。

11、經(jīng)比較，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。模型組TLR-4、NF-κ Bp65蛋白陽性表達面積增加;高劑量組與模型組比較，其TLR-4、NF-κ Bp65蛋白陽性表達面積減少，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。低、中劑量組與模型組比較，TLR-4、NF-κ Bp65蛋白表達差異不明顯(P＞0.05)。模型組大鼠結腸黏膜TLR-4、NF-κ Bp65mRNA呈高表達變化;而治療組TLR-4、NF-κ Bp65mRNA表達下降，與模型組比較，有統(tǒng)計

12、學意義(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.加味柴芍六君顆?？梢越档蚒C患者NF-KBp50、血清C反應蛋白水平，減輕病變結腸的炎癥程度，改善便血、腹痛及腹瀉等臨床癥狀，促進潰瘍愈合，其臨床療效與美沙拉嗪腸溶片大致相當，而且安全、無明顯毒副作用。另外，加味柴芍六君顆粒改善患者生存質量方面優(yōu)于美沙拉嗪，值得推廣應用。
　　2.加味柴芍六君顆?？赡芡ㄟ^下調TLR-4、NF-κ Bp65表達，緩解腸道炎癥，促進潰瘍愈合，而