新型血小板源生長因子對放創(chuàng)復(fù)合傷大鼠創(chuàng)面的促愈作用.pdf

1、研究背景:放射損傷合并創(chuàng)傷稱為“放創(chuàng)復(fù)合傷”，戰(zhàn)時多見于核爆炸，平時見于核事故、核恐怖活動及放化療后，其特點表現(xiàn)為傷口經(jīng)久不愈。前期研究發(fā)現(xiàn)其難愈的機制與放射損傷導(dǎo)致局部修復(fù)細(xì)胞數(shù)量減少和功能障礙以及抑制基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生生長因子等相關(guān)，如何促進(jìn)難愈性傷口的愈合始終是研究的重點。血小板源生長因子（platelet-derived growth factor，PDGF）是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的，能刺激間質(zhì)來源的細(xì)胞增殖的多肽，具有廣泛的生理活性，在創(chuàng)

2、傷愈合的各個階段都發(fā)揮作用，對創(chuàng)傷的修復(fù)有明顯的促進(jìn)作用。美國已上市用于治療糖尿病足部潰瘍的Regrenex(0.01％rh-PDGF-BB)，每支售價高達(dá)400多美元，限制其臨床的應(yīng)用。為滿足戰(zhàn)傷愈合軍隊特需藥品研發(fā)的需要，中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所在前期研究的基礎(chǔ)上，從Pichia酵母中表達(dá)純化，研制了新型血小板源生長因子(RecombinantHuman Platelet-derived Growth Fact

3、or-BB，rhThr6-PDGF-BB)，在重大新藥創(chuàng)制的資助下（課題編號:2011ZXJ09104-03B），本項目承擔(dān)新的重組人血小板源生長因子對放創(chuàng)復(fù)合傷難愈性的藥效評價。應(yīng)用放創(chuàng)復(fù)合傷的實驗動物模型，觀察rhThr6-PDGF-BB對放創(chuàng)復(fù)合傷創(chuàng)面愈合的影響，為開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的難愈性創(chuàng)傷新藥物提供理論依據(jù)。
　　方法:選用Wistar大鼠120只，60Co-γ射線全身照射，照射劑量為4Gy同時合并直徑2cm皮膚全層

4、切口，制作大鼠皮膚放創(chuàng)復(fù)合傷模型。隨機分為空白對照組，凝膠基質(zhì)對照組，低劑量藥物組，中劑量藥物組，高劑量藥物組，陽性藥物對照組共6組，每組20只大鼠，在潔凈動物間飼養(yǎng)，每日將相應(yīng)的藥物涂于創(chuàng)面，觀察傷后各組創(chuàng)面愈合情況，計算創(chuàng)面愈合百分比、形態(tài)學(xué)觀察創(chuàng)面上皮細(xì)胞遷移、肉芽組織生長狀況和新生血管密度情況，免疫組化檢測Bcl-2蛋白、PDGF-A和VEGF蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:傷后14d，中、高劑量藥物組大鼠創(chuàng)面基本愈合，創(chuàng)面愈

5、合速度明顯加快，而對照組愈合速度較慢，14d時創(chuàng)面未完全愈合，中、高劑量藥物組與空白對照組愈合速度有顯著性差異(P＜0.05)。rhThr6-PDGF-BB藥物組上皮移行速率快，肉芽組織出現(xiàn)較早，成纖維細(xì)胞和新生毛細(xì)血管均較對照組豐富，高劑量藥物組較為明顯。在新生肉芽組織中PDGF-A、VEGF和Bcl-2表達(dá)增加，rhThr6-PDGF-BB促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機制可能是:一方面rhThr6-PDGF-BB可以直接促進(jìn)局部修復(fù)細(xì)胞趨化和遷移