間歇性低氧對大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)和心肌糖代謝的影響及利莫那班的干預(yù)作用.pdf

1、目的：探討間歇低氧對大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)和心肌葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4（GLUT4）的影響以及大麻素受體1（CB1R）拮抗劑-利莫那班干預(yù)作用，評估內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)（ECS）是否參與心肌糖代謝過程。
　　方法：1.32只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分為4組，即常氧組（NC組）、間歇性低氧組（IH組）、間歇性低氧聯(lián)合生理鹽水組（IH+NS組）、間歇性低氧聯(lián)合利莫那班組（IH+Rim組），每組各8只。H組和IH+NS組及IH+Rim大鼠分別置于IH艙內(nèi)

2、，而常氧組大鼠艙內(nèi)持續(xù)給予等時間、等流量的壓縮空氣，每日通氣8小時，連續(xù)28天。IH組和利莫那班干預(yù)組及生理鹽水組大鼠分別置于IH艙內(nèi)，而常氧組大鼠艙內(nèi)持續(xù)給予等時間、等流量的壓縮空氣，每日通氣8小時，連續(xù)28天。2. IH+Rim組在IH基礎(chǔ)上每只大鼠給予利莫那班經(jīng)口灌胃（10ml?kg-1?d-1）直至實驗結(jié)束。IH+NS組在 IH基礎(chǔ)上每只大鼠給予同等量生理鹽水（NS）注射用水經(jīng)口灌胃（10ml?kg-1?d-1）。3.28天后，

3、采集各組大鼠動脈血，化學(xué)發(fā)光法檢測大鼠空腹血糖（FPG）及放射免疫法檢測空腹胰島素（FINS）水平并計算胰島素抵抗指數(shù)(IRI）,胰島素敏感指數(shù)（ISI）。同時透射電鏡觀察各組大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)并用Flameng半定量分析法分析線粒體損傷程度。免疫組化測定大鼠心肌CB1R及葡萄糖轉(zhuǎn)蛋白4（GLUT4）蛋白，RT-qPCR測定大鼠心肌CB1RmRNA及GLUT4mRNA水平。
　　結(jié)果：1.與NC相比，IH組大鼠FINS、IRI水平明

4、顯升高，心肌CB1R及CB1R mRNA水平升高，ISI水平明顯降低，心肌GLUT4及GLUT4mRNA表達(dá)水平降低（均P<0.05）。2.與NC組對比，IH組大鼠透射電鏡下可見心肌線粒體損傷明顯，線粒體 Flameng評分升高（P<0.05）。3.利莫那班干預(yù)后，IH+NS組透射電鏡下心肌超微結(jié)構(gòu)破壞得到一定程度緩解；大鼠FINS、HOMA-IR、心肌CB1及CB1RmRNA水平下降，ISI及心肌GLUT4及GLUT4mRNA水平上升

5、(均 p<0.05)。4.大鼠 IRI與心肌組織 GLUT4mRNA之間呈明顯負(fù)相關(guān)(r-0.677。P<0.01)，與心肌組織 CB1RmRNA之間呈明顯正相關(guān)相關(guān)(r0.543。P<0.01)；心肌組織CB1R與GLUT4mRNA之間呈負(fù)相關(guān)(r-0.800，P<0.01)。
　　結(jié)論：1.IH暴露可以使大鼠心肌CB1R蛋白及mRNA表達(dá)水平升高，心肌線粒體及超微結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，經(jīng)相關(guān)性分析提示心肌 CB1RmRNA與GLUT4

6、mRNA表達(dá)量負(fù)相關(guān)，大鼠IRI與心肌組織GLUT4mRNA之間呈明顯負(fù)相關(guān)，與心肌組織 CB1RmRNA之間呈明顯正相關(guān)相關(guān)，心肌組織 CB1R與GLUT4mRNA之間呈負(fù)相關(guān)，提示IH可能通過影響心肌CB1R表達(dá)量，進(jìn)而影響心肌 GLUT4表達(dá)，阻礙心肌胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，進(jìn)而參與心肌 IR形成，心肌胰島素抵抗參與機(jī)體 IR發(fā)生發(fā)展。2.利莫那班干預(yù)后，使損傷的線粒體得以修復(fù)，上調(diào)心肌細(xì)胞GLUT4的表達(dá)，通過影響心肌胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)