麥粒灸保護(hù)自發(fā)性高血壓大鼠主動(dòng)脈血管內(nèi)皮Rho-ROCK信號(hào)通路機(jī)制.pdf

1、目的:
　　觀察麥粒灸對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)的治療效應(yīng)，探討麥粒灸通過(guò)調(diào)控Rho/ROCK信號(hào)通路抗SHR血管損傷的作用機(jī)制。
　　方法:
　　將SHRs隨機(jī)分為模型組和麥粒灸組，Wistar Kyoto大鼠(WKY)大鼠設(shè)為空白組，觀察艾灸對(duì)SHRs的治療效應(yīng)。干預(yù)前測(cè)量各組大鼠血壓，并記錄。模型組、空白組大鼠常規(guī)抓取固定不做其他干預(yù)，每日1次，連續(xù)28天。麥粒灸組每天抓取固定后于同一時(shí)間段取“足三里穴”“曲池

2、穴”進(jìn)行麥粒灸治療，每穴灸5壯，艾炷燒至約剩1/3時(shí)撤去，每日1次，連續(xù)28天。末次實(shí)驗(yàn)干預(yù)結(jié)束，再測(cè)各組血壓值并記錄。用10％水合氯醛麻醉大鼠，取血和主動(dòng)脈。用比色法測(cè)各組大鼠血清SOD、MDA、NO含量觀察艾灸抗SHR氧化應(yīng)激效應(yīng)。用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清中IL-6、IL-10、hs-CRP及ICAM-1的含量觀察艾灸抗炎作用。用日式全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清TG、CHOL、HDL、LDL、ox-LDL的含量觀察艾灸

3、的降脂作用。用HE染色觀察各組大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變，用代謝組學(xué)技術(shù)觀察SHR與正常大鼠代謝物的改變，用Real-Time RCR和Wwstern Blot的方法檢測(cè)大鼠主動(dòng)脈Rho/ROCK信號(hào)通路相關(guān)基因與蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)血壓:實(shí)驗(yàn)干預(yù)前，模型組大鼠血壓高于空白組(P＜0.01)，麥粒灸組大鼠血壓高于空白組(P＜0.01)，模型組與麥粒灸組組間無(wú)差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，空白組大鼠血壓與實(shí)驗(yàn)前無(wú)

4、明顯變化(P＞0.05)。與空白組相比，模型組大鼠血壓升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，與模型組相比，麥粒灸組血壓降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(2)氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo):與空白組大鼠相比，模型組大鼠血清MDA升高，而SOD含量下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。麥粒灸組大鼠血清MDA升高，而SOD含量下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與模型組大鼠相比，麥粒灸組大鼠血清MDA下降，而SOD含量上升，

5、差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(3)NO含量:與空白組大鼠相比，模型組大鼠血清NO含量下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與模型組大鼠相比，麥粒灸組大NO含量上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(4)血脂:與空白組大鼠相比，模型組大鼠血清TG、CHOL、LDL、ox-LDL升高，而HDL下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。麥粒灸組大鼠血清TG、CHOL、LDL、HDL含量與空白組無(wú)明顯差異(P

6、＞0.05)。與模型組大鼠相比，麥粒灸組大鼠血清TG、CHOL、LDL、ox-LDL下降，而HDL上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(5)炎性因子:與空白組大鼠相比，模型組大鼠血清IL-6、ICAM-1、hs-CRP升高，而IL-10下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與模型組大鼠相比，麥粒灸組大鼠血清IL-6、ICAM-1、hs-CRP下降，而IL-10上升，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(

7、6)HE染色:與模型組相比，麥粒灸組大鼠僅出現(xiàn)較輕微血管結(jié)構(gòu)損傷情況，可見(jiàn)部分內(nèi)皮細(xì)胞脫落，中膜彈性纖維形態(tài)不規(guī)則，出現(xiàn)部分?jǐn)嗔选?br>　　(7)血清代謝組學(xué):通過(guò)主成分分析PCA得分圖能夠?qū)⒄＝M、模型組、麥粒灸組大鼠血漿代謝產(chǎn)物很好地聚類(lèi)區(qū)分，差異代謝化合物27種，主要?dú)w類(lèi)為氨基酸代謝物、糖代謝、脂代謝異常。
　　(8) RT-PCR結(jié)果:與空白組相比，模型組Rho/ROCK通路的RhoA、ROCK1、VEGF、VEGFR2

8、、MLC基因表達(dá)均上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與模型組相比，麥粒灸組RhoA、ROCK1、VEGF、VEGFR2、MLC基因表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　(9)WB結(jié)果:與空白組相比，模型組Rho/ROCK通路的RhoA、ROCK1、VEGF、VEGFR2、MLC蛋白表達(dá)均上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與模型組相比，麥粒灸組RhoA、ROCK1、VEGF、VEGFR2、MLC蛋白表達(dá)下降，