鈣蛋白酶Capn1促進(jìn)肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文第一部分C a p n l 及E M T 指標(biāo)在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌中的表達(dá)及其相關(guān)性的研究2目的：研究C a p n l 及E ．c a d h e r i n 、S n a i l 在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織和對(duì)應(yīng)的癌旁肝臟組織中的表達(dá)情況，探討C a p n l 與E M T 標(biāo)志物細(xì)胞黏附分子上皮型鈣粘蛋白( E ．c a d h e r i n ) 和間質(zhì)相關(guān)蛋白S n a i l 在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌中的表達(dá)及其相關(guān)性。

2、方法：應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)1 4 0 例肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者病理組織中C a p n l 、S n a i l 和E ．c a d h r e i n 的表達(dá)；應(yīng)用w e s t e r n b l o t 方法檢測(cè)四組肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織C a p n l 的表達(dá)；應(yīng)用S P S S l 6 ．0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：w e s t e r n b o l t 及免疫組化學(xué)結(jié)果均顯示在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織中，C a p n l 表達(dá)高于癌

3、旁組織，兩者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( p < 0 ．0 5 ) ；早期復(fù)發(fā)病人C a p n l 表達(dá)較未復(fù)發(fā)組患者明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( p < 0 ．0 5 ) ；免疫組化結(jié)果顯示S n a i l 在癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織，而E ．c a d h e r i n 在癌組織中的表達(dá)低于癌旁組織。結(jié)論：C a p n l 、S n a i l 在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織中表達(dá)上調(diào)，而E ．c a d h e r i n

4、 在肝內(nèi)膽管細(xì)胞腫瘤中表達(dá)下調(diào)；C a p n l 與S n a i l 、E ．c a d h e r i n 之間具有顯著相關(guān)性( p < 0 ．0 5 ) ；早期復(fù)發(fā)患者腫瘤組織中C a p n l 表達(dá)升高。第二部分C a p n l 與肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系及其與E M T 診斷預(yù)后的價(jià)值目的：通過免疫組化方法檢測(cè)C a p n l 、E ．c a d h e r i n 及S n a i l 在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌

5、組織中的表達(dá)，探討C a p n l 與肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系及其與E ．c a d h e r i n 、S n a i l 的預(yù)后意義。方法：應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)1 4 0 例肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌病理組織中C a p n l 、E ．c a d h e r i n 及S n a i l 的表達(dá)，探索C a p n l 與臨床病理特征的關(guān)系及其與E ．c a d h e r i n 、S n a i l 預(yù)后診斷價(jià)值。結(jié)果：C a

6、 p n l 高表達(dá)與肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者的血清C A l 9 —9 表達(dá)及腫瘤數(shù)目相關(guān)( p < o ．0 5 ) 。C a p n l 、S n a i l 高表達(dá)組術(shù)后總體生存率明顯低于C a p n l 低表達(dá)組( p < 0 ．0 5 ) ，累計(jì)復(fù)發(fā)率明顯高于C a p n l 低表達(dá)組( p < 0 ．0 5 ) ；E - c a d h e r i n 高表達(dá)組術(shù)后總體生存率高于C a p n l 低表達(dá)組

7、而復(fù)發(fā)率低于C a p n l 低表達(dá)組。單因素及多因素分析顯示C a p n l 、E - c a d h e r i n 及S n a i l 表達(dá)是患者總體生存率和累計(jì)復(fù)發(fā)率的獨(dú)立預(yù)后因子。揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文 4P r o g n o s t i cs i g n i f i c a n c eo f C a p n l o v e r e x p r e s s i o na n d i t sr o l ei n1 n V

8、a S l O n a n d m e t a s t a s i si nI n t r a h e p a t i cC h o l a n g i o c a r c i n o m aA b s t r a c tI n t r a h e p a t i cc h o l a n g i o c a r c i n o m a ( I C C ) i s a p r i m a r y m a l i g n a n t l

9、e t h a lp r i m a r y e p i t h e l i a lc a n c e ro ft h eh e p a t o b i l i a r yt r a c tt h a te x h i b i t sc h a r a c t e r i s t i c so f c h o l a n g i o c y t ed i f f e r e n t i a t i o n ．I tr e p r e s

10、 e n t st h es e c o n d a r y l i v e r n e o p l a s ma f t e rh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a a n d a c c o u n t i n gf o r5 ％t o 10 ％o fp r i m a r y l i v e rc a n c e r s [ 1 ] ．A l t h o u g hc o n s

11、 i d e r e dt ob ea no r p h a nc a n c e r ，t h ei n c i d e n c eo f I C C h a si n c r e a s e d w i d e l y w o r l d w i d e i nr e c e n t d e c a d e s ，e s p e c i a l l y i np a r t s o f E a s t e r n A s i a [

12、 2 ，3 ] ．A tt h et i m eo f d i a g n o s i s ，p a t i e n t s g e n e r a l l y h a v e d i s e a s eb e y o n d t h el i m i t so f r e s e c t i o n b e c a u s e o f a n a d v a n c e dt u m o r s t a g e a n d t h e

13、r e s e c t a b i l i t y r a t eh a s b e e n q u i t el o w a n d v a r i a b l e ( 18 - 7 0 ％) [ 3 】．U n f o r t u n a t e l y ,t h e g r e a tm a s so fI C C p a t i e n t sh a v e a p o o rp r o g n o s i se v e n a

14、 f t e rs u r g i c a lr e s e c t i o n ．T h u s ，a ni m p r o v e d u n d e r s t a n d i n go f t h e m o l e c u l a r m e c h a n i s m s a s s o c i a t e d w i t hI C C p r o g r e s s i o n i sn e e d e da n d w

15、o u l d b eb e n e f i c i a li nd e v e l o p i n g e f f e c t i v et h e r a p e u t i c s t r a t e g i e s ．T h ec a l p a i ns y s t e mi s a n i m p o r t a n tg r o u p o fo v e r 12k n o w n m a m m a l i a ni n

16、 t r a c e l l u l a rl i m i t e dp r o t e a s e s t h a t s h a r eas i m i l a rc a t a l y t i cs t r u c t u r e [ 4 ] ．T h ec a l p a i ns y s t e mh a sb e e ni m p l i c a t e di nt u m o r i g e n e s i s t h r

17、 o u g ha l t e r e d e x p r e s s i o n a n da c t i v i t y i n aw i d ev a r i e t y o ft u m o rt y p e s [ 5 ] ，i n c l u d i n gb r e a s tc a n c e r 【6 ，7 ] ，o v a r i a nc a n c e ra n dp a n c r e a t i cc a n

18、 c e r [ 8 】．A m o n g t h e m ，t h et w ou b i q u i t o u si s o f o r m s ，C a p n l a n d C a p n 2a r e t h em o s tw i d e l ys t u d i e df a m i l y m e m b e r sa n d d e f i n e db y t h e i rc a l c i u m r e

19、q u i r e m e n t sf o ri nv i t r oa c t i v a t i o n [ 5 ] ．A sas u b u n i to f c a l p a i n s ，c a l p a i nl a r g es u b u n i t1 ( C a p n l ) p l a y s a ni m p o r t a n t r o l ei nc a l p a i n c a t a l y t

20、 i ca c t i v i t yH o w e v e r , o n l yf e w s p o r a d i cs t u d i e sh a v ef o c u s e d o n t h e r o l eo f C a p n li nI C C ．I nO u rs t u d y ，w ed e t e c t e d t h ee x p r e s s i o no f C a p n l i n14 0

21、h u m a nI C C t i s s u e sa n dm a t c h e d n o n -t u m o r t i s s u e s ．T h e n ，w e i n q u i r e d i n t o t h e c o r r e l a t i o n b e t w e e n C a p n l e x p r e s s i o n a n dc l i n i c o p a t h o l o

22、 g i c a lm o d u l u sa n di d e n t i f i e dw h e t h e rC a p n l c o u l d b ea c r u c i a lf a c t o rf o rc l i n i c a ld i a g n o s i s i nI C Cp a t i e n t s ．U s i n gs i R N A —m e d i a t e dk n o c k d o

23、 w n e x p r e s s i o n o fC a p n l ，w ea l s oa s s e s s e dt h a ti fC a p n lW a s i n v o l v e di nI C C c e l l si n v a s i o n ，m i g r a t i o na n dp r o l i f e r a t i o ni nv i t r o ．A d d i t i o n a l

24、l y , w ef u r t h e r i n v e s t i g a t e dt h e r e l a t i o n s h i pb e t w e e nt h e e x p r e s s i o n C a p n la n dt h ee x p r e s s i o no f t h eE M T - r e l a t e d m a r k e r s s n a i l a n d E - c a

25、 d h e r i ni nI C C s a m p l e s a n d c e l l s ．P a r t1 E x p r e s s i o n o f C a p n 1 ，E —c a d h e r i na n dS n a i li n i n t r a h e p a t i cc h o l a n g i o c a r c i n o m a a n d t h ec o r r e l a t i

26、o nb e t w e e n t h e mO b j e c t i v e ：T oi n v e s t i g a t et h e e x p r e s s i o no fC a p n l ，E —c a d h e r i na n dS n a i l i n I C C t i s s u e sa n dm a t c h e d n o n ．t u m o r t i s s u e sa n d i t