層層組裝氧化苦參堿微囊的制備和釋放性的研究.pdf

1、隨著惡性腫瘤發(fā)病率越來(lái)越高，惡性腫瘤是當(dāng)今人類(lèi)所必需面對(duì)的難題之一，所以如今抗腫瘤藥物的研發(fā)在醫(yī)療領(lǐng)域占有重要的地位。近幾年，中成藥在抗腫瘤領(lǐng)域有一定的進(jìn)展，在化學(xué)結(jié)構(gòu)方面，中藥具有一定的多樣性，而且不同中藥對(duì)腫瘤的作用機(jī)制也不同，所以，中成藥在對(duì)抗腫瘤活性方面具有巨大的潛力。將傳統(tǒng)中藥提取并進(jìn)行分離后可以到其主要成分氧化苦參堿，氧化苦參堿具有毒性低效率高的特點(diǎn)，具有很有效的抗腫瘤作用。雖然其在抗腫瘤作用方面效果明顯，但存在給藥過(guò)后生物

2、利用度低，而且所需劑量大等缺點(diǎn)，所以在實(shí)際應(yīng)用方面還有很多不足，因此我們利用層層自組裝法對(duì)氧化苦參堿進(jìn)行包裝，制備成氧化苦參堿微囊，從而增加藥物的生物利用度，降低給藥劑量。
　　第一部分：LBL法氧化苦參堿微囊的制備及包封率的測(cè)定的建立
　　目的：建立測(cè)定氧化苦參堿層層自主裝微囊包封率高效液相色譜法，并測(cè)定其包封率。方法：色譜柱:Thermo Sycronis C18，流動(dòng)相:乙腈-0.2％磷酸溶液(13：87，V/V)（三

3、乙胺調(diào)節(jié)pH為8.0），檢測(cè)波長(zhǎng):220nm，流動(dòng)相流速:1 mL/min。采用低溫高速離心分離微囊中的游離藥物。結(jié)果：氧化苦參堿在20~300ug/mL范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r為0.999，平均回收率為99.63%，儀器精密度RSD≤1.74%。結(jié)論：所建立的高效液相色譜法符合HPLC的檢測(cè)要求，所采用的高效液相色譜法能準(zhǔn)確測(cè)定LBL法所制備氧化苦參堿載藥微囊中氧化苦參堿的含量以及微囊的包封率，具有簡(jiǎn)單，快捷，專(zhuān)屬性高等優(yōu)點(diǎn)。
　　第

4、二部分：LBL法制備微囊的表征和理化性質(zhì)的初步探究
　　目的：對(duì)層層自組裝法制備的微囊的表征和理化性質(zhì)進(jìn)行初步探究。方法：利用投射電子顯微鏡對(duì)層層自主裝微囊進(jìn)行觀察，并測(cè)定其粒徑。利用電位儀對(duì)每層組裝的表面電勢(shì)電位進(jìn)行測(cè)定?？疾焖幬矬w外不同時(shí)間藥物的累計(jì)釋放量，并探究了組裝層數(shù)對(duì)氧化苦參堿藥物釋放的影響。結(jié)論：通過(guò)投射電子顯微鏡對(duì)LBL微囊的觀察，顯示用LBL法組裝的微囊粒徑、分散度、均勻度良好，達(dá)到了微型膠囊所需的要求，進(jìn)一步通

5、過(guò)Zeta電位儀對(duì)組裝的每層的表面電勢(shì)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明帶相反電荷的聚電解質(zhì)成功組裝在模板核表面上，測(cè)定了LBL載藥微囊3~180min時(shí)間段藥物的平均累計(jì)釋放量，結(jié)果顯示， OM藥物從微囊中釋放并沒(méi)有突釋的情況，而是從微囊中緩慢釋放，有一定的緩釋作用。比較了組裝2、5、7、10層載藥微囊在3~180min時(shí)間段藥物的平均累計(jì)釋放量，組裝2層的微囊在60min內(nèi)藥物基本釋放完全，平均累計(jì)釋放量為72.4±2.35（%），組裝5層的載藥微

6、囊在100min內(nèi)基本釋放完全，平均累計(jì)釋放量為75.1±0.26（%），組裝7層的載藥微囊在100min內(nèi)基本釋放完全，平均累計(jì)釋放量為74.5±0.26（%），組裝10層的載藥微囊在180min內(nèi)基本釋放完全，平均累計(jì)釋放量為76.4±1.03（%），表明包裝的層數(shù)越多，微囊表面聚電解質(zhì)所形成的膜越厚，緩釋效果越明顯。
　　第三部分：LBL載藥微囊作用細(xì)胞內(nèi)外藥物濃度的測(cè)定
　　目的：對(duì)層層自組裝載藥微囊作用細(xì)胞的內(nèi)外藥

7、物濃度進(jìn)行測(cè)定，探究其對(duì)癌細(xì)胞的作用。方法：利用高效液相色譜法建立細(xì)胞內(nèi)外藥物濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定并對(duì)比氧化苦參堿載藥微囊和游離微囊作用于癌細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)外濃度變化。結(jié)論：細(xì)胞內(nèi)液藥物濃度0.62~10.00ug/mL區(qū)域內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r為0.998檢出限為0.15ug/mL（S/N=3)，平均回收率98.2%,樣品穩(wěn)定性RSD≤2.14%,日間精密度RSD≤1.80%，日內(nèi)精密度RSD≤2.10%,細(xì)胞外液藥物濃度0.1~5.0