忍冬葉中活性成分的動(dòng)態(tài)變化研究.pdf

1、忍冬葉為忍冬(Lonicera japonica Thunb)科植物忍冬的葉片。研究表明忍冬葉中具有多種活性成分，然而目前大多忍冬葉仍作為非藥用部位被遺棄。為了有效開發(fā)利用忍冬葉，本論文以忍冬葉為研究對(duì)象，對(duì)其不同生長期的活性成分進(jìn)行分析研究，并與忍冬花（金銀花）和綠芽做相應(yīng)比較，以揭示不同生長期忍冬葉中活性成分的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。初步考察了不同生長期忍冬葉提取物的抗菌作用。研究結(jié)果可為忍冬葉的綜合利用提供理論依據(jù)和技術(shù)參考。主要內(nèi)容包括以

2、下四個(gè)部分：
　　1.忍冬葉活性成分多組分同時(shí)測(cè)定的HPLC方法建立
　　首先建立了同時(shí)檢測(cè)忍冬葉中9種活性成分（綠原酸、新綠原酸、咖啡酸、異綠原酸C、蘆丁、木犀草苷、金絲桃苷、木犀草素和槲皮素）含量的高效液相色譜方法，用該方法對(duì)忍冬葉中9種物質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這9種成分的含量差異較大，其中異綠原酸C和綠原酸的含量相對(duì)較高，其次是木犀草苷和蘆丁，木犀草素和咖啡酸的含量相對(duì)較低，在該實(shí)驗(yàn)條件下，未檢出槲皮素。所建立的方法操

3、作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)。
　　2.忍冬植株不同部位活性成分的測(cè)定
　　采用高效液相色譜法（HPLC）、紫外分光光度法（UV-vis）和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）分別對(duì)同一采摘期的忍冬葉、綠芽和花中9種成分（綠原酸、新綠原酸、咖啡酸、異綠原酸C、蘆丁、木犀草苷、金絲桃苷、木犀草素和槲皮素）、總黃酮和揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，葉中木犀草苷、異綠原酸C、蘆丁、木犀草素的含量明顯高于花和綠芽中，葉中新綠原酸含量與花和

4、綠芽中相近，綠原酸的含量高于花中但小于綠芽中。忍冬葉中總黃酮含量為6.68％，低于綠芽中總黃酮的含量（7.38%），但兩者均高于花中總黃酮的含量（6.35%）?；ê腿~中主要揮發(fā)性成分沒有明顯差異，均為烴類化合物，含量分別為：忍冬葉66.07%，花70.75%，綠芽67.94%。其中綠芽、花和葉中揮發(fā)性成分的種類分別有25種、20種和21種。由此可見忍冬葉具有進(jìn)一步研究的價(jià)值和意義。
　　3.不同生長期忍冬葉中活性成分的變化研究

5、r>　　采用上述方法測(cè)定不同生長期忍冬葉中活性成分的變化，結(jié)果表明，不同生長期忍冬葉中9種活性成分的含量差異較大，6月份所測(cè)各種活性成分含量均較高。異綠原酸C和綠原酸的含量在不同生長期均相對(duì)較高，其次是木犀草苷和蘆丁，木犀草素和咖啡酸的含量相對(duì)較低，金絲桃苷僅存在于1、2、3、10、11、12月份，（亦即：在4月-9月份所采的葉子中未檢測(cè)到），但是在12個(gè)月份所采的葉子中，均未檢測(cè)出槲皮素?？傸S酮在6月份（6.68%）、7月份（6.56

6、%）和12月份（6.02%）的含量較高。揮發(fā)油成分測(cè)定結(jié)果得，5月份的烴類化合物總量最高，為83.15%；7月份的種類最多22種，接著是6月份和11月份都是21種，3月份的最少僅有13種。
　　4.忍冬植株不同部位體外抗菌活性初步考察
　　采用打孔法對(duì)忍冬葉、綠芽和花的抑菌活性進(jìn)行初步考察，對(duì)金黃色葡萄球菌（SA），β-內(nèi)酰胺酶陽性金黃色葡萄球菌（ESBLs-SA），大腸桿菌（Escherichia Coli），β-內(nèi)酰胺酶