潤(rùn)燥靈治療干燥綜合征的臨床療效觀察及對(duì)模型小鼠Th1-Th2細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:
　　1.探討中藥潤(rùn)燥靈湯治療干燥綜合征(SS)的臨床療效。
　　2.通過構(gòu)建SS模型小鼠，探討中藥潤(rùn)燥靈湯對(duì)SS模型小鼠Ⅰ型T輔助細(xì)胞(Th1)/Ⅱ型T輔助細(xì)胞(Th2)的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:
　　1.臨床研究:納入符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的SS患者60例，采用簡(jiǎn)單隨機(jī)分組方法分為治療組和對(duì)照組，各30例。治療組給予中藥潤(rùn)燥靈湯口服，對(duì)照組服用硫酸羥氯喹片（0.2g1次/日）口服，兩組療程均為3個(gè)月，治療結(jié)束后評(píng)價(jià)

2、2組患者中醫(yī)證候?qū)W改善情況、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及疾病活動(dòng)度指數(shù)評(píng)分的影響。
　　2.試驗(yàn)研究:把90只SPF級(jí)C57雌性小鼠隨機(jī)分為6組，每組15只，分別為空白組、模型組、潤(rùn)燥靈湯高、中、低劑量和強(qiáng)的松對(duì)照組，除空白對(duì)照組外，其余各組均采用免疫誘導(dǎo)法建立SS模型。第5周開始分別灌服中藥高、中、低劑量和強(qiáng)的松混懸液，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服等量生理鹽水，連續(xù)灌胃治療4周后，分別取小鼠頜下腺、肺、腎進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察;采用酶聯(lián)免疫吸附法(E

3、LISA)檢測(cè)小鼠血清中Th1細(xì)胞干擾素-γ(IFN-γ)和Th2細(xì)胞白介素-4（IL-4）的表達(dá)含量;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)小鼠頜下腺轉(zhuǎn)錄因子T-bet和轉(zhuǎn)錄因子GATA-3的表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)Th1、Th2細(xì)胞數(shù)量。
　　結(jié)果:
　　1.臨床研究:2組中醫(yī)癥候療效比較，治療組總有效率86.7％，對(duì)照組總有效率46.7％，治療組有效率高于對(duì)照組。對(duì)炎性指標(biāo)的改善方面，兩組治療后均能降低ESR

4、、CRP水平，治療組還能降低IgG水平;兩組治療后ESR、CRP比較，無差異;而在降低IgG水平方面治療組優(yōu)于對(duì)照組。在疾病活動(dòng)指數(shù)方面，兩組治療后，均能降低ESSDAI、ESSPRI評(píng)分;治療組能明顯降低ESSPRI評(píng)分，治療組和對(duì)照組在降低 ESSDAI評(píng)分無差異;而在ESSPRI評(píng)分上治療組優(yōu)于對(duì)照組。
　　2.動(dòng)物研究:造模兩周后，在第3-4周各組小鼠飲水量均增加;治療后，第5-6周潤(rùn)燥靈高劑量組和強(qiáng)的松組飲水量較模型組下

5、降;在第7-8周，較模型組相比，潤(rùn)燥靈中、高、強(qiáng)的松組飲水量明顯降低;逐漸接近空白組。模型組出現(xiàn)不同程度的頜下腺損害，中藥高劑量和強(qiáng)的松具有減輕頜下腺炎癥反應(yīng)的作用。ELISA結(jié)果:SS模型小鼠IFN-γ和IL-4含量明顯升高，治療后，潤(rùn)燥靈高劑量組及強(qiáng)的松組能顯著減少IFN-γ和IL-4含量。PT-PCR法:SS模型小鼠主要以T-bet含量升高為主，經(jīng)治療后，潤(rùn)燥靈高劑量組能在一定程度上減少T-bet的表達(dá)，進(jìn)一步調(diào)節(jié)T-bet/GA

6、TA-3比值，使T-bet/GATA-3比值接近空白組。FCM結(jié)果:SS模型小組在CD4+T淋巴細(xì)胞中IFN-γ和IL-4所占比值明顯升高，潤(rùn)燥靈高劑量組、強(qiáng)的松組IFN-γ所占比值降低;潤(rùn)燥靈高、中劑量組能IL-4所占比值降低，潤(rùn)燥靈高劑量組及強(qiáng)的松組明顯降低IFN-γ/IL-4比值。
　　結(jié)論:
　　1.中藥用潤(rùn)燥解毒、化瘀通絡(luò)方法組成的潤(rùn)燥靈湯能有效的改善SS的主要臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)、疾病活動(dòng)指數(shù)。
　　2.潤(rùn)