間歇性斷食對(duì)腸道菌群及宿主代謝的影響.pdf

1、目的:
　　1.研究間歇性斷食對(duì)老年前期肥胖大鼠代謝及腸道菌群的影響。
　　2.研究不同斷食形式對(duì)人體腸道菌群的影響。
　　3.研究飲水?dāng)嗍硨?duì)人體代謝的影響。
　　方法:
　　1.雌性Wistar大鼠經(jīng)42w高脂高糖飼料飼養(yǎng)造模，根據(jù)體質(zhì)量（(x)±SD）選取模型鼠進(jìn)行間歇性斷食干預(yù)。干預(yù)方法為每2w斷食72h，總干預(yù)時(shí)間18w。干預(yù)后進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)、血脂四項(xiàng)檢測(cè)。收集糞便，通過(guò)Illumina高通

2、量測(cè)序檢測(cè)16S rRNA基因V4可變區(qū)，運(yùn)用BIPES、QIIME及LEfSe分析腸道菌群。
　　2.招募健康志愿者進(jìn)行持續(xù)7日的斷食實(shí)驗(yàn)，分為飲水?dāng)嗍辰M和果汁斷食組。收集斷食前兩周至斷食后四周的糞便樣本，通過(guò)Illumina高通量測(cè)序檢測(cè)16S rRNA基因V4可變區(qū)，運(yùn)用BIPES、QIIME及LEfSe分析腸道菌群。
　　3.收集飲水?dāng)嗍辰M志愿者在斷食前后的血液標(biāo)本，進(jìn)行生理生化指標(biāo)檢測(cè)以及預(yù)處理后進(jìn)行核磁共振分析樣

3、本中的代謝產(chǎn)物。使用MestReNova對(duì)1H CPMG譜進(jìn)行分析，Simca-P進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析。根據(jù)人類(lèi)代謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)斷食前后有統(tǒng)計(jì)差異的代謝產(chǎn)物成分進(jìn)行鑒定。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠實(shí)驗(yàn)中間歇性斷食組體質(zhì)量相對(duì)于模型對(duì)照組顯著下降(P＜0.01);高密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇均顯著下降(P＜0.05);空腹血糖顯著上升(P＜0.01);葡萄糖耐量測(cè)試曲線(xiàn)下面積顯著高于模型對(duì)照組，糖耐量減退(P＜0.05)

4、;HE染色顯示間歇性斷食輕度減少肝臟脂肪變性。腸道菌群結(jié)果顯示，斷食組腸道菌群得到顯著改善，具體表現(xiàn)為YS2、RF32、Helicobacteraceae（螺桿菌科）增加，Lactobacillus（乳桿菌屬）、Roseburia（羅氏菌屬）、Erysipelotrichaceae（韋榮球菌科）、Ralstonia（青枯菌屬）、Bradyrhizobiaceae（慢生根瘤菌科）和RF39減少。Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)Bradyrh

5、izobiaceae與總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇呈正相關(guān);RF39與大鼠體質(zhì)量呈正相關(guān)。
　　2.飲水?dāng)嗍潮裙瓟嗍硨?duì)人腸道菌群的影響更為強(qiáng)烈，且效果在宿主恢復(fù)飲食后能長(zhǎng)久維持。但飲水?dāng)嗍车男Ч哂袀€(gè)體差異，總的來(lái)看飲水?dāng)嗍衬苁鼓c道菌群變成以Prevotella（普雷沃氏菌屬）、Bacteroides（擬桿菌屬）、Faecalibacterium（柔嫩菌屬）和Succinivibrio（琥珀酸弧菌屬）為主。
　　3.飲水?dāng)?/p>

6、食前后的代謝產(chǎn)物水平存在明顯差異，斷食期間3-羥基丁酸酯和乙酰乙酸的表達(dá)上升(P＜0.05)，而丙氨酸、谷氨酸鹽、組氨酸、氧化三甲胺、β-葡萄糖、α-葡萄糖的表達(dá)顯著下降(P＜0.05)。斷食期間，機(jī)體的血糖、胰島素、甘油三酯下降，酮體、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、血肌酐、血尿酸、皮質(zhì)醇升高，提示機(jī)體可能通過(guò)促進(jìn)代謝脂肪酸、肌肉、核酸等物質(zhì)產(chǎn)生能量。機(jī)體代謝改變可能與脂肪酸合成、鳥(niǎo)氨酸循環(huán)、氨基酸代謝、丙氨酸循環(huán)、轉(zhuǎn)錄翻譯、酮體代謝、

7、三羧酸循環(huán)、糖異生、糖酵解等多個(gè)通路相關(guān)。在恢復(fù)飲食3天后代謝產(chǎn)物水平恢復(fù)至與斷食前相似。
　　結(jié)論:
　　1.間歇性斷食能改善腸道菌群，降低老年前期肥胖大鼠體質(zhì)量和血脂水平，但對(duì)糖代謝可能有不良影響。
　　2.無(wú)卡路里攝入比限制卡路里攝入的斷食方式對(duì)腸道菌群影響更大。
　　3.飲水?dāng)嗍衬馨褦M桿菌為主的腸道菌群變?yōu)橐云绽孜质暇鸀橹?，而?duì)普雷沃氏菌為主的腸道菌群結(jié)構(gòu)影響不大。
　　4.機(jī)體在飲水?dāng)嗍称陂g可能通