Hp相關(guān)性胃炎脾胃濕熱證病機(jī)轉(zhuǎn)化規(guī)律及其代謝組學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　Hp相關(guān)性胃炎的發(fā)展存在這樣一種病理演進(jìn)路徑：慢性非萎縮性胃炎一慢性萎縮性胃炎一腸上皮化生一不典型增生一癌變。當(dāng)前大部分中醫(yī)學(xué)者認(rèn)為Hp與脾胃濕熱關(guān)系密切，從中醫(yī)的病因理論看，Hp應(yīng)當(dāng)是一種濕熱病邪，Hp相關(guān)性胃炎與濕熱溫病關(guān)系緊密。葉天士在《臨證指南醫(yī)案》中提出“初病濕熱在經(jīng)，久則瘀熱入絡(luò)”，尤在涇在《金匱要略心典》中也有：“無邪不有毒，熱從毒化，變從毒起，瘀從毒結(jié)也”的觀點(diǎn)。濕熱致病病程綿長(zhǎng)，逐漸生變。濕熱之邪侵犯

2、人體，其初起病情較為輕淺，但濕熱膠結(jié)、蘊(yùn)蒸日久則化瘀化毒、瘀毒互結(jié)，入里入絡(luò)，致使疾病日趨嚴(yán)重。濕熱化毒瘀似乎和Hp相關(guān)性胃炎的病理演變有某種暗合。中醫(yī)推崇上工治未病，如何從中醫(yī)溫病理論中發(fā)掘Hp相關(guān)性胃炎的發(fā)病規(guī)律？Hp相關(guān)性胃炎向胃癌發(fā)展過程中是否伴隨有濕熱化毒瘀的過程？這種轉(zhuǎn)化存在客觀物質(zhì)基礎(chǔ)嗎？本課題圍繞這些核心問題展開，在分析傳統(tǒng)中醫(yī)經(jīng)典理論和現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)者研究的基礎(chǔ)上，從中發(fā)掘Hp相關(guān)性胃炎脾胃濕熱證病機(jī)轉(zhuǎn)化的規(guī)律，同時(shí)采用代

3、謝組學(xué)研究的方法，尋找脾胃濕熱及濕熱轉(zhuǎn)化的相關(guān)物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1.理論研究：在梳理了中醫(yī)濕熱病的發(fā)展與源流后，我們集中整理了明清溫病學(xué)家所闡發(fā)的相關(guān)理論，并對(duì)現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)者有關(guān)Hp相關(guān)性胃炎的相關(guān)研究進(jìn)行分類總結(jié)。
　　2.代謝組學(xué)研究：采集2015年1月至2016年1月在武漢地區(qū)5家醫(yī)院確診的慢性胃炎、胃癌患者各100例，進(jìn)行14C尿素呼氣試驗(yàn)檢測(cè)Hp、胃鏡檢查等，并進(jìn)行中醫(yī)辨證分型。入選實(shí)驗(yàn)對(duì)象為符合納入

4、標(biāo)準(zhǔn)的脾胃濕熱型慢性胃炎患者20例，脾胃濕熱型胃癌患者20例，另選取在武漢市中醫(yī)醫(yī)院保健科體檢的健康人群20例設(shè)為健康對(duì)照組。EP管收集符合納入標(biāo)準(zhǔn)的患者及健康志愿者的中段晨尿10ml，采集尿液的核磁譜圖，對(duì)得到的相關(guān)數(shù)據(jù)采用PCA和PLS-DA進(jìn)行分析并驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　　1.理論研究結(jié)果
　　1.1脾胃濕熱病機(jī)的主要轉(zhuǎn)化方式
　　盡管新感溫病和伏氣溫病在發(fā)病上有所不同，但在濕熱病機(jī)的傳變方面并沒有太大差異

5、。從衛(wèi)氣營(yíng)血辨證來看，脾胃濕熱證會(huì)向營(yíng)血分發(fā)展，也可能因治療得當(dāng)，在氣分而愈。從三焦辨證看，脾胃濕熱證發(fā)生在中焦脾胃，可以蘊(yùn)蒸其中“在一經(jīng)不移”，也可以向下傳及下焦之臟肝腎或下焦之腑大腸、小腸、膀胱；還可以向上傳及肺、心包、腦。從經(jīng)絡(luò)來看，脾胃濕熱證拖延日久，會(huì)出現(xiàn)久病入絡(luò)，合并血瘀證。
　　“實(shí)則陽(yáng)明，虛則太陰”，脾胃陽(yáng)氣的強(qiáng)盛與否影響著脾胃濕熱證的轉(zhuǎn)化方向。再者，體質(zhì)類型影響著脾胃濕熱證的轉(zhuǎn)歸結(jié)局，陰虛之人出現(xiàn)脾胃濕熱容易陰液

6、更虧，最終出現(xiàn)陰虛風(fēng)動(dòng)證，陽(yáng)虛之人的脾胃濕熱證最終出現(xiàn)腎陽(yáng)虛。體質(zhì)條件對(duì)脾胃濕熱證的發(fā)生、轉(zhuǎn)化和結(jié)局有至關(guān)重要的影響。
　　1.2 Hp相關(guān)性胃炎至胃癌的中醫(yī)病機(jī)轉(zhuǎn)化研究
　　Hp感染通過不同的作用機(jī)制導(dǎo)致慢性胃炎，在疾病的后果及嚴(yán)重程度上除了細(xì)菌因素起重要作用外，宿主的免疫反應(yīng)也是Hp相關(guān)性疾病發(fā)生，特別是胃癌發(fā)生的重要決定因素。
　　Hp在胃黏膜定植后，在其繁殖、孳生、蔓延的過程中分泌毒素，暗耗人體陰陽(yáng)氣血，破壞人

7、體平衡。Hp所致胃病的發(fā)病特點(diǎn)符合溫病中伏氣溫病的特點(diǎn)，發(fā)病過程中隱現(xiàn)濕熱化毒瘀的病機(jī)轉(zhuǎn)化規(guī)律。
　　2.代謝組學(xué)研究結(jié)果
　　2.1一般情況
　　在進(jìn)行證候判別、病理分級(jí)確診病例并篩選后，入選實(shí)驗(yàn)對(duì)象60例，分為A、C、D三個(gè)組，每組20例。A組為脾胃濕熱型慢性胃炎組，C組為脾胃濕熱型胃癌組，D組為健康對(duì)照組。三組人員在性別、年齡、體重指數(shù)上的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.2代謝組學(xué)分析結(jié)果
　　本實(shí)驗(yàn)通過

8、對(duì)樣本的1H-NMR譜圖進(jìn)行分析，并對(duì)其種類進(jìn)行歸類后，找到可以定性定量的代謝物共59種：Ⅰ.氨基酸及其衍生物（20種）；Ⅱ.氨基化合物與混合胺（9種）；Ⅲ.糖類（5種）；Ⅳ.有機(jī)酸類（15種）；Ⅴ.其他類（10種）。
　　通過對(duì)三組人員進(jìn)行尿液代謝組學(xué)檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)：在PCA圖中可以看到健康對(duì)照組與胃炎組，健康對(duì)照組與胃癌組有分開趨勢(shì)，但胃炎組與胃癌組兩組樣本無法分離，進(jìn)一步通過PLS-DA分析方法發(fā)現(xiàn)胃炎組與胃癌組樣本有分開趨勢(shì)

9、，胃癌組與健康對(duì)照組樣本有分開趨勢(shì)，胃炎組與健康對(duì)照組樣本分離。并通過VIP圖等找到三組尿液中差異代謝物11種，最后篩選出8種代謝物的差異具有顯著性意義，分別是：巖藻糖、磷酸肌酸、馬尿酸、甘油、葫蘆巴堿、?；撬帷⒀趸装?、N-苯乙酰甘氨酸。
　　通過對(duì)脾胃濕熱證組（A+C組）和健康對(duì)照組（D組）進(jìn)行尿液代謝組學(xué)檢測(cè)分析，在PCA得分圖中可以看出脾胃濕熱證組與健康對(duì)照組樣本有分開趨勢(shì)。進(jìn)一步在 PLS-DA得分圖中可以看出，脾胃濕

10、熱證組樣本和健康對(duì)照組樣本明顯分離，說明其代謝輪廓相異。并通過VIP圖等找到兩組尿液中差異代謝物12種，最后篩選出8種代謝物為脾胃濕熱證的潛在生物標(biāo)志物：馬尿酸、?；撬帷r藻糖、甘油、葫蘆巴堿、氧化三甲胺、磷酸肌酸、葡萄糖。相對(duì)于健康對(duì)照組而言，脾胃濕熱證組中上調(diào)的差異代謝物為：牛磺酸、巖藻糖、甘油、氧化三甲胺、葡萄糖。下調(diào)的差異代謝物為：馬尿酸、葫蘆巴堿、磷酸肌酸。
　　結(jié)論：
　　1、從溫病的經(jīng)典著作和現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)者的研究

11、總結(jié)來看，Hp相關(guān)性胃炎濕熱病機(jī)傳變?cè)诳傮w上呈現(xiàn)這一趨勢(shì)：濕熱久蘊(yùn)，正氣日損，瘀毒漸生。
　　2、Hp作為致病因素可以歸屬于濕熱伏氣，Hp相關(guān)性胃炎更容易形成脾胃濕熱證，Hp的發(fā)作與它的毒素基因類型有關(guān)，也與宿主的體質(zhì)緊密相關(guān)，陽(yáng)虛質(zhì)、氣虛質(zhì)、痰濕質(zhì)、濕熱質(zhì)患者更易罹患本病，Hp相關(guān)性胃病發(fā)展與濕熱化毒瘀，正氣耗損有關(guān)。
　　3、脾胃濕熱證組與健康對(duì)照組的代謝組學(xué)差異提示脾胃濕熱證存在客觀物質(zhì)基礎(chǔ)。慢性胃炎脾胃濕熱證與胃癌脾