Anti-CK18和Anti-CK19自身抗體與慢性阻塞性肺疾病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:近年來(lái)，許多研究報(bào)道，自身免疫在慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，而且針對(duì)CK18和CK19的自身抗體與肺組織損傷有關(guān)。本研究通過(guò)檢測(cè) COPD患者血漿中 anti-CK18和 anti-CK19 IgG、IgA、IgM型自身抗體水平變化以及研究香煙煙霧對(duì)CK18和CK19的自身抗體產(chǎn)生的影響，探討anti-CK18和anti-CK19自身抗體在COPD發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:1.收集COPD患者血標(biāo)

2、本228例和年齡性別匹配的正常對(duì)照血標(biāo)本136例，用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血漿中anti-CK18和anti-CK19 IgG、IgA、IgM型自身抗體的水平變化，分析anti-CK18和anti-CK19自身抗體與COPD患者肺功能不同分期的關(guān)系，同時(shí)對(duì)不同分期COPD患者的臨床資料進(jìn)行分析；2. C57BL/6J雄性小鼠暴露于香煙煙霧中建立COPD動(dòng)物熏煙模型，分別暴露6個(gè)月和9個(gè)月，同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組，取其血清和肺臟，應(yīng)用間接酶

3、聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)香煙煙霧暴露組和正常對(duì)照組小鼠血清中anti-CK18和anti-CK19 IgG、IgA、IgM型自身抗體的水平變化；3.用4％多聚甲醛固定小鼠左肺，HE染色檢測(cè)經(jīng)香煙煙霧暴露后小鼠肺組織的病理學(xué)改變；用間接免疫熒光檢測(cè)香煙煙霧暴露組和正常對(duì)照組小鼠肺組織中的IgG、IgA、IgM型抗體分布情況；4采用western blot技術(shù)檢測(cè)香煙煙霧暴露組小鼠肺組織中是否存在anti-CK18和anti-CK19 IgG型自

4、身抗體。
　　結(jié)果:1. COPD患者血漿anti-CK18和anti-CK19 IgG、IgA、IgM型自身抗體水平明顯高于正常對(duì)照組，尤其是COPD III期和GOLD IV期，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。隨著疾病的嚴(yán)重程度逐漸增加，anti-CK18 IgG、IgM型自身抗體和anti-CK19 IgA、IgM型自身抗體的水平逐漸增加，但是anti-CK18 IgA型抗體和anti-CK19 IgG型抗體水平并未隨著

5、疾病加重而逐漸增加。COPD患者具有明顯的吸煙史趨勢(shì)，其肺功能較正常對(duì)照組顯著降低。此外，anti-CK18 IgG、IgA、IgM型自身抗體和anti-CK19 IgA、IgM型自身抗體與COPD患者肺功能FEV1占預(yù)計(jì)值百分比之間呈負(fù)相關(guān)；2.6個(gè)月和9個(gè)月香煙煙霧暴露組小鼠血清anti-CK18和anti-CK19 IgG型抗體水平明顯較對(duì)照組高，但是血清anti-CK18和anti-CK19 IgG型抗體在6個(gè)月與9個(gè)月煙霧暴露

6、組之間并沒(méi)有明顯變化，說(shuō)明其IgG型抗體水平變化與煙霧暴露環(huán)境密切相關(guān)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。而在香煙煙霧暴露9個(gè)月后小鼠血清anti-CK18和anti-CK19 IgA型抗體水平顯著高于香煙煙霧暴露6個(gè)月后小鼠血清含量；3.香煙煙霧暴露組小鼠的肺組織出現(xiàn)明顯的病理改變，香煙煙霧暴露6個(gè)月后小鼠肺泡壁出現(xiàn)輕度破壞，伴有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，香煙煙霧暴露9個(gè)月后小鼠肺組織出現(xiàn)大量的肺泡融合擴(kuò)大，并伴有部分炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；小鼠肺部

7、IgG、IgA、IgM型抗體主要分布于肺泡間隔、小氣道壁和血管壁。6個(gè)月和9個(gè)月香煙煙霧暴露組小鼠肺組織的IgG、IgA、IgM型抗體表達(dá)率比較分別為57.1%、42.9%、57.1%和40%、33.3%、46.7%，表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高；4. Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示在香煙煙霧暴露組小鼠IgG、IgA、IgM型抗體分布陽(yáng)性的肺組織中存在針對(duì)CK18和CK19的IgG型自身抗體。
　　結(jié)論:Anti-CK18和ant