鎘致腎功能損傷與miRNA-21表達(dá)變化的關(guān)系研究.pdf

1、目的：①探討太原市鎘高污染地區(qū)和低污染地區(qū)居民鎘的暴露情況，以及年齡、性別、吸煙對尿鎘水平的影響。②探討不同污染地區(qū)人群的腎功能損傷情況，分析尿鎘與腎功能指標(biāo)之間的相關(guān)關(guān)系，尋找腎損傷的影響因素。③通過基因芯片篩選外周血中差異表達(dá)的miRNA，揭示miRNA-21表達(dá)改變在鎘致腎損傷中的作用。④對相關(guān)的miRNA進(jìn)行生物信息學(xué)分析，為進(jìn)一步探討鎘暴露致腎功能損傷的機(jī)制提供新的思路。
　　方法：選擇鎘污染嚴(yán)重的武宿村和污染較輕的柴村

2、作為兩個研究現(xiàn)場，對兩個研究現(xiàn)場的研究對象進(jìn)行一般情況的信息收集和生物樣品的采集，共收集了479份；用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀對內(nèi)暴露指標(biāo)-尿鎘進(jìn)行檢測；通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測腎損傷因子1水平和人微量白蛋白的含量，比色法測定尿N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶的活力；肌氨酸氧化酶法測定尿肌酐；miRNA芯片篩選不同樣品中差異表達(dá)的miRNA，并對相關(guān)的miRNA進(jìn)行qRT-PCR驗證，通過生物信息學(xué)分析尋找miRNA靶基因富集的信號通路、細(xì)胞組分

3、、分子功能和生物學(xué)過程。
　　結(jié)果：⑴在年齡構(gòu)成、婚姻狀況、受教育程度、家庭人均月收入方面高鎘暴露組和低鎘暴露組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。⑵高鎘暴露組人群體內(nèi)鎘負(fù)荷水平高于低鎘暴露組（P<0.001），不同年齡段尿鎘水平不同，高鎘暴露組中尿鎘水平存在隨年齡增大而增高（Ptrend=0.003）。吸煙對尿鎘水平有影響（P=0.018）。⑶腎損傷指標(biāo)：高尿鎘組mALB水平高于低尿鎘組（P<0.001）；高鎘暴露組NAG水

4、平高于低鎘暴露組（P=0.002），高尿鎘組NAG水平高于低尿鎘組（P=0.001），高鎘暴露組和低鎘暴露組NAG存在隨年齡的增大而增大；在高鎘暴露組和低鎘暴露組，高尿鎘組和低尿鎘組，均未發(fā)現(xiàn)Kim-1存在統(tǒng)計學(xué)差異，但在低鎘暴露組Kim-1隨年齡的增大而增大。⑷腎損傷指標(biāo)和尿鎘之間的相關(guān)性分析結(jié)果顯示：尿鎘與三個腎損傷指標(biāo)都存在正相關(guān)關(guān)系，腎損傷指標(biāo)NAG與mALB、Kim-1之間存在正相關(guān)關(guān)系，但mALB和Kim-1之間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)關(guān)

5、系。⑸年齡和尿鎘與腎損傷有關(guān)，年齡（OR=1.65，95％CI:1.31~2.08），尿鎘（OR=1.49，95%CI:1.01~2.21），兩者是腎損傷的危險因素。⑹上調(diào)的基因：miRNA-1260b、miRNA-6131、miRNA-4664-5p、miRNA-4284、miRNA-7977、miRNA-21等23個基因，下調(diào)的基因：miRNA-4417。⑺腎損傷組和正常組之間存在miRNA-21表達(dá)差異，損傷組是正常組表達(dá)量的5.

6、78倍；高尿鎘組和低尿鎘組之間存在miRNA-21表達(dá)差異，高尿鎘組是低尿鎘組表達(dá)量的5.06倍。⑻miRNA-21靶基因主要富集于細(xì)胞氮化合物代謝過程、生物合成過程、細(xì)胞蛋白修飾過程、基因表達(dá)、共生、病毒過程、生物進(jìn)程等生物學(xué)過程，細(xì)胞器、胞質(zhì)溶膠、蛋白復(fù)合物、核質(zhì)等細(xì)胞組分中，離子結(jié)合、酶結(jié)合、RNA結(jié)合、核酸結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性、聚（A）RNA結(jié)合等分子功能上；癌癥中的microRNA、癌癥中的蛋白多糖、乙型肝炎、癌癥中的途徑、脂肪酸