松江鱸(Trachidermus fasciatus)腎細胞系的建立及生物學特性分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文研究了松江鱸(Trachidermus fasciatus)腎組織細胞系的建立過程，并分析了細胞生物學特性。結果表明組織塊培養(yǎng)法適用于松江鱸腎的原代培養(yǎng)；在25℃、5％CO2培養(yǎng)箱中，原代培養(yǎng)啟動24h后有細胞貼壁牢固，36h后有細胞遷出，30d后長滿單層；主要為成纖維樣細胞；采用胰酶消化法進行傳代，傳代細胞生長與分裂狀態(tài)良好，20代后松江鱸腎5-6d便可長成單層，原代培養(yǎng)和早期培養(yǎng)時，培養(yǎng)液的成分是添加5ng/mL人堿性成纖維細胞

2、生長因子(bFGF)、20μg/mL硫酸軟骨素、40ng/mLI型胰島素樣生長因子(IGF-I)的20%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基；35代后，所有培養(yǎng)液為20%FBS-DMEM/F12。目前，松江鱸腎組織細胞已傳至55代，成功建立松江鱸腎組織細胞系。經(jīng)實驗測定松江鱸腎組織細胞的群體倍增時間為別為56.32h，35代松江鱸腎組織細胞的核型分析結果是2n=40；核型公式為：14m+10sm+16t。病毒敏感性實驗表明松江鱸腎組織細胞對

3、魚類諾達病毒不敏感，對鯉春病毒血癥病毒敏感，測定病毒滴度為106.53TCID50/mL。
　　松江鱸腎組織細胞在不同血清濃度(0%、5%、10%、15%、20%)、不同濃度硫酸軟骨素(0、10、20、30、40μg/mL)、不同濃度人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)（0、2.5、5、7.5、10ng/mL）以及不同濃度I型胰島素樣生長因子(IGF-I)（0、10、20、30ng/mL）條件下的生長特性研究結果表明：松江鱸腎組織

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