中華眼鏡蛇毒短鏈神經(jīng)毒素和環(huán)核苷酸門控離子通道抑制劑類似蛋白的晶體學(xué)研究.pdf

1、中華眼鏡蛇粗毒經(jīng)三步柱層析可純化出一種新的短鏈神經(jīng)毒素Atratoxin.運(yùn)用懸滴法,我們培育出了可供X-射線衍射到高分辨率的單晶.先后在該實(shí)驗(yàn)室和美國(guó)康奈爾大學(xué)的MacCHESS的A1和F2光束上完成了1.6埃分辨率和1.0埃分辨率的數(shù)據(jù)收集和處理.晶體的空間群為C222<,1>,一個(gè)不對(duì)稱單位由A和B兩個(gè)分子組成.中華眼鏡蛇初毒經(jīng)三步柱層析純化出另一個(gè)25kDa的非致死性蛋白.N-端序列測(cè)定為NVDFNSESTR RKKCQKEIV

2、D LHNSLRRCVS,經(jīng)序列同源比較發(fā)現(xiàn)它是CRISP (cysteine-rich Secretory proteins)家族的一個(gè)新成員,命名為CRISP-like toxin,也是爬行動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的第三個(gè)CRISP家族成員.其N-端相似于鼠、馬和人等的CRISP.CRISP是一類分子量大約為24-30kDa糖蛋白,分布于唾液.附睪、蛇毒等中.目前發(fā)現(xiàn)的CRISP家族成員還不多,研究也還處在初步階段,已有的證據(jù)表明CRISP作用對(duì)

3、象為離子通道,在精子成熟、信號(hào)傳導(dǎo)等過程中起作用.與CRISP-liketoxin種屬來源相近的有pseudechetoxin,它是一個(gè)從澳洲眼鏡蛇粗毒中純化出來的一個(gè)環(huán)核苷酸門控離子通道抑制劑蛋白,因此我們也稱CRISP-like toxin為環(huán)核苷酸門控離子通道抑制劑類似蛋白,但目前還未能證明CRISP-liketoxin是否也能作用于環(huán)核苷酸門控離子通道.總之,對(duì)CRISP-like toxin的研究具有一定的基礎(chǔ)和應(yīng)用價(jià)值.目前