[雙語(yǔ)翻譯]---（節(jié)選）醫(yī)學(xué)外文翻譯---賁門癌和食管癌在分子和臨床上的不同（譯文）

1、1中文 中文 3890 字出處： 出處：Tanière P, Martel-Planche G, Maurici D, et al. Molecular and Clinical Differences between Adenocarcinomas of the Esophagus and of the Gastric Cardia[J]. American Journal of Pathology, 2001, 158(1

2、):33-40.賁門癌和食管癌在分子和臨床上的不同 賁門癌和食管癌在分子和臨床上的不同摘要帶有 Barrett’s 粘膜的食管腺癌（ADCE）和賁門腺癌（ADCC）經(jīng)常被認(rèn)為是同一種病理疾病。在本研究中，我們用嚴(yán)格的解剖病理標(biāo)準(zhǔn)來(lái)區(qū)分這兩種損傷，我們發(fā)現(xiàn)兩者在TP53 突變，MDM2 基因擴(kuò)增和細(xì)胞角蛋白表達(dá)上有著不同。從 26 個(gè) ADCC 和 28 個(gè)ADCE 患者的福爾馬林固定，石蠟包埋的切片中提取了 DNA。TP53 突變用暫時(shí)

3、溫度梯度電泳檢測(cè)，用測(cè)序鑒定。MDM2 基因擴(kuò)增用 differential PCR 評(píng)定。細(xì)胞角蛋白 4，7，13的表達(dá)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)。在 ADCC，男女比例為 1.8:1，在 ADCE 中為 27:1。5 個(gè)ADCC 患者有其他腫瘤的病史，在 ADCE 中有一個(gè)。兩種腫瘤在 TP53 突變(31% 在ADCC 中 ，50%在 ADCE 中)，MDM2 基因擴(kuò)增(19%在 ADCC 中，4%在 ADCE 中),細(xì)胞角蛋白 7 (

4、在 ADCE 中 100% 陽(yáng)性，在 ADCC 中 41% 陽(yáng)性)和細(xì)胞角蛋白 13（在 ADCE中 81%陽(yáng)性，在 ADCC 中 36.5%陽(yáng)性）表達(dá)方式上有著不同。ADCE 和 ADCC 在臨床特點(diǎn)，在 TP53 突變，MDM2 基因擴(kuò)增和細(xì)胞角蛋白表達(dá)上有著不同。這些結(jié)果支持 ADCE和 ADCC 是不同的病理疾病的說(shuō)法。背景介紹過(guò)去的二十年中，美國(guó)和一些西歐國(guó)家胃食管接合部腫瘤的發(fā)病率以每年 5~10%的速率在增加 1。增加的原

5、因還不清楚。胃食管接合部腫瘤主要有兩種：食管腺癌(ADCE)和賁門腺癌(ADCC)。(ADCE)出現(xiàn)在食管遠(yuǎn)端，由 Barrett’s 粘膜發(fā)展而來(lái)。Barrett’s 粘膜是鱗狀上皮的腺樣化生，高度在幾毫米到幾厘米之間。有證據(jù)表明，化生的粘膜細(xì)胞是雜合細(xì)胞，既表達(dá)鱗狀細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞角蛋白(CK4 and 13)，又表達(dá)腺細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞角蛋白(CK8 and 19) 2，還具有鱗狀細(xì)胞和腺細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的特征 3。而且，還常常表達(dá) CK

6、7，而在賁門粘膜的腸上皮化生的細(xì)胞中從不表達(dá) 4。Barrett’s 粘膜常常與慢性胃食管返流有關(guān)。它也伴隨慢性膽道堿性返流的出現(xiàn) 5。易引起 Barrett’s 粘膜的因素還未完全理清。近來(lái)的證據(jù)表明，谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶 P1 的某種多態(tài)表達(dá)可能是發(fā)展為 Barrett’s 粘膜的遺傳易感性的因素 6。在美國(guó)的一般人群中，Barrett’s 粘膜是很常見的損傷（>10%） 。賁門是食管和胃之間的移行部位。用肉眼不能鑒別。在顯微

7、鏡下，賁門是一層有少量腺細(xì)胞的薄粘膜，而無(wú)泌酸細(xì)胞。高度在 1mm 到 5mm 之間，隨著年齡的增長(zhǎng)而增加?！癆DCC“的意思是位于賁門區(qū)域的腫瘤。但并未明確腫瘤是來(lái)源于真正的賁門粘膜還是附近的上基底粘膜。賁門處可有腸上皮化生，尤其在有慢性炎癥的時(shí)候。但還沒(méi)有明確的證據(jù)表明化生能發(fā)展為 ADCC。在許多研究中，常把 ADCC 和 ADCE 合稱為胃食管接合部腺癌，但這樣就會(huì)排除了返流以外的特殊的危險(xiǎn)因素。吸煙的作用還在爭(zhēng)論 8-11。肥

8、胖癥和抗高血壓藥能松弛賁門括約肌，有助于慢性胃食管返流，故被認(rèn)為是間接的危險(xiǎn)因素。攝取高熱量和脂肪也有可能12，13。相反，攝取較多的纖維，煙酸，維生素 B6，鐵和鋅則有助于防止腫瘤的發(fā)展 8，10，12。在分子水平上，TP53 突變是胃食管接合部腫瘤中最常見的改變。在 ADCE 中，58%的病例有 TP53 突變。最常見的類型是 CpG 上的 C 向 T 突變(50%)。突變?cè)谀[瘤形成早期就已出3梯度電泳。陰性對(duì)照（野生型）和陽(yáng)性對(duì)照

9、（已知突變）也用上述分析。顯示有額外和/或異常帶的樣品再用基因組 DNA 和暫時(shí)溫度梯度電泳檢測(cè)。如果確定了，從第二個(gè)凝膠中切下突變的等位基因，用相同的引物再擴(kuò)增一次，用不對(duì)襯 PCR 擴(kuò)增后，直接測(cè)序分析20,22。有兩個(gè) p53 免疫染色陽(yáng)性的樣本，在暫時(shí)溫度梯度電泳中未顯示有異常帶的可再生模型（1 樣本，表 1；2 樣本，表 2） 。在這兩個(gè)樣本中，mRNA 從冰凍的活檢標(biāo)本中提取，cDNA 用 Flaman 等人的 23 酵母菌

10、功能測(cè)定法準(zhǔn)備和測(cè)定。陽(yáng)性克隆用 ABI PRISM 310 基因分析機(jī)(Perkin Elmer Biosystems, Foster City, CA)測(cè)序。MDM2 基因擴(kuò)增的分析用改進(jìn)的差異 PCR：5 µl 的模板 DNA 在含有 20 pmol 對(duì) MDM2 和多巴胺 D2 受體基因 DRD2 引物，200 µmol/L 每個(gè) dNTP, 1x 擴(kuò)增緩沖液, 1 X Q 液體和 0.5 µl (

11、2.5 U) of HotStarTaq DNA 聚合酶(Qiagen)的 50 µl 反應(yīng)混合物。PCR 的條件是：95°C15 分鐘，95°C45 秒 27 個(gè)循環(huán)，55°C45 秒，72°C1 分鐘，72°C 擴(kuò)增 5 分鐘后結(jié)束。引物如下：5'-GAGGGCTTTGATGTTCCTGA-3' (sense) 和 5'-GCTACTAGAA GT

12、TGATGGC-3' (anti-sense) 對(duì) MDM2,和 5'-CCACTGAATCTGTCCTGGTATG-3' (sense)和 5'-GTGTGGCATAGTAGTTGTAGTGG-3' (anti-sense)對(duì)人 DRD2。PCR 產(chǎn)物用 7.5%聚丙酰胺凝膠電泳，溴乙錠染色，照相，膠卷中掃描密度測(cè)定法分析(GS-670; BioRad, Hercules, CA)。MDM

13、2/DRD2 的比值在 2.5 或 2.5 以上，則認(rèn)為 MDM2 又?jǐn)U增，若比值在 2 到 2.5之間則認(rèn)為可能有 MDM2 擴(kuò)增。統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)自變量的頻率表用 Pearson’s 卡方檢驗(yàn)來(lái)統(tǒng)計(jì)。結(jié)果病人的臨床和個(gè)體特點(diǎn)1995~1999 年之間收集了 26 個(gè) ADCC 和 28 個(gè) ADCE。有一個(gè)病例，根據(jù)活檢為Barrett’s 粘膜，而歸為 ADCE。ADCC 病人的平均年齡為 62.1 ± 13.6 歲，ADCE

14、 病人的平均年齡為 68.1 ± 9 歲。ADCC 中有 17 個(gè)男性，9 個(gè)女性，而 ADCE 中有 27 個(gè)男性，1 個(gè)女性。短期隨訪發(fā)現(xiàn) ADCC 病人中有 5 個(gè)有其他腫瘤。在 ADCE 中只有一個(gè)病人有既往腫瘤史。TP53 突變31%的 ADCC 和 50%的 ADCE 檢測(cè)出有 TP53 突變。兩例 ADCE 中檢測(cè)出兩個(gè)突變。突變譜顯示，62.5% ADCC 和 31%ADCE 的突變是在 CpG 的 C 到

15、T 轉(zhuǎn)換。用 CM-1 抗體的免疫組化技術(shù)在兩種腫瘤的 92%中發(fā)現(xiàn)有 TP53 突變和 P53 過(guò)表達(dá)。MDM2 表達(dá)和基因擴(kuò)增50%的 ADCC 有 MDM2 蛋白表達(dá)（用免疫組化技術(shù)檢測(cè)至少 10%腫瘤細(xì)胞） 。用differential PCR 檢測(cè)出 19%的 ADCC 腫瘤包括 MDM2 基因擴(kuò)增。40%的 ADCE 有 MDM2蛋白表達(dá)（用免疫組化技術(shù)檢測(cè)） 。細(xì)胞角蛋白 4，7，13 的表達(dá)癌前病變和癌變常保留了這些細(xì)胞