革葉蕨的離體培養(yǎng)和快速繁殖.pdf

1、本研究以三叉蕨科革葉蕨屬革葉蕨(Rumohraadiantiformis)為材料，對革葉蕨的離體培養(yǎng)和快速繁殖進行了研究。一、將革葉蕨外植體用不同殺菌劑、不同溫度熱水浴預處理，探討減少初代培養(yǎng)污染率的有效措施。二、以初代培養(yǎng)獲得的無菌外植體接種在含有一定濃度激素的培養(yǎng)基中，研究不同類型外植體分化能力的強弱并進行脫分化程度的比較。三、最佳分化外植體在正交設計2因素(蔗糖濃度、基本培養(yǎng)基)3水平條件下進行不定芽誘導的試驗及最佳pH值的篩選，

2、并進一步研究激素的種類和濃度對不定芽誘導增殖的影響。四、研究不同激素處理對不定芽生根的影響，得到健壯生根組培苗后，再進行不同基質配方對組培苗移栽成活率和生長勢影響的試驗，得到理想的效果，為獲得優(yōu)質的革葉蕨苗，提供了生產(chǎn)依據(jù)。 結果表明： (1)降低初代培養(yǎng)過程中污染率的方法 用3g/L根菌清殺菌劑對外植體進行24h預處理可使無菌率達到96.67％。效果明顯好于最佳水浴處理(40℃處理1h)。 (2)不同部

3、位外植體分化能力和脫分化程度的比較 革葉蕨莖段、葉片和葉柄接種在附加一定濃度IAA和NAA的MS培養(yǎng)基上后，均可不同程度的分化出芽，器官分化能力的強弱順序為：莖尖＞莖段＞葉柄＞葉片；莖尖接種后20d左右產(chǎn)生綠色球狀物，經(jīng)60天培養(yǎng)產(chǎn)生叢生苗，葉柄和葉片出芽慢，在培養(yǎng)30d后切口處先形成少量瘤狀結構，40d后切口處形成簇生芽，其中葉片在與葉柄相連的切口處更易于長芽，而較細小的上部或邊緣葉片接種后大多褐化，誘導能力弱。 (3

4、)不定芽的誘導增殖方法 試驗結果得出，以無菌莖段在蔗糖濃度30g/L、pH值5.80的1/2MS培養(yǎng)基中誘導不定芽效果最好；添加植物激素，均可不同程度的分化出芽，其中以IAA0.10mg/L+NAA0.05mg/L的增殖效果最好。 (4)組培苗生根及移栽 生根培養(yǎng)的最佳配方為NAA0.10mg/L的1/2MS培養(yǎng)基，生根率最高為96％，且愈傷組織少，其平均生根率和平均最大根長值在各處理中表現(xiàn)最好。移栽成活率以河沙