實驗室常用儀器的使用與簡單養(yǎng)護

1、,,常用儀器的使用與簡單養(yǎng)護,常用儀器,,,4,,,移液器,1,,,2,,,3,,,5,電子天平,離心機,高壓滅菌鍋,干燥箱,移液器的類型,根據(jù)排液方式,一類是氣墊式（內置）活塞移液器 （諾禾實驗室常用）一類是外置式活塞移液器,根據(jù)通道數(shù),單道多道（8道和12道）還可以分為：手動自動（電動）,諾禾常用的移液器品牌有Eppendorf （德國）、RAININ（美國）、GILSON（法國）、Thermo（美國）,諾禾實驗室常用的移

2、液器,Eppendorf Research Plus,外部結構,1 控制鈕—第一檔：液體體積計量； 第二擋：排出吸嘴內剩余液體2 調節(jié)鈕—設定移液量3 彈射鍵—彈除吸頭4 調整開孔—系統(tǒng)校正調整5 彈射套筒6 多道移液器下半段7 蓋板8 下半段分離鍵9 外罩,內部結構,活塞不與樣品直接接觸,活塞桿,工作原理,空氣置換原理：通過活塞、彈簧的伸縮運動，調節(jié)空氣負壓和正壓來實現(xiàn)吸液和排液。,排出部分空氣

3、,空氣墊,壓力減小,按鍵下壓,按鍵釋放,活塞向下移動,活塞向上移動,量程內原則 —— 即所需移取的體積必須在移液器的量程內半量程原則 —— 即使用同一移液器，在半量程以上相對于半量程以下要精確就小不就大原則 ——即移取同一體積的液體，應選用最大量程較小的移液器,選擇量程,量程：0.1-2.5ul、0.5-10ul、2-20ul、10-100ul、20-200ul、100-1000ul,容量設定,

4、由大到小原則： 當由小容量調到大容量時，應調整到大于設定容量值的 1/4 圈，再回調至設定值，這樣可排除機械間隙。（不要超過最大量程，否則可能會卡住內部機械裝置而損壞移液器）,順時針調小 逆時針調大,不同量程移液器技術參數(shù)：,,,安裝吸頭,吸頭選擇：與移液器相匹配！,單道移液器——旋轉安裝法：將移液器垂直插入吸頭，在稍許用力下壓的同時，左右輕輕旋轉，上緊吸頭。,切勿用“反復撞擊”吸頭的方法來進行安裝；否則長

5、期以往會導致零部件松散，甚至使調節(jié)刻度的旋鈕卡住。,多道移液器———將移液器的第一道對準第一個吸頭，傾斜插入，其它吸頭前后搖動上緊。,正向吸液是常用的吸液方式最適用于水性溶液，如：水緩沖液稀鹽溶液稀酸堿溶液,吸液,按下控制鈕至第一檔； 將吸頭垂直進入液面下1-5mm（視吸頭容量而定）： 0.1-10 ul 容量 1 - 2 mm； 2-200 ul 容量

6、 2 - 3 mm； 1 – 5 ml 容量 3 - 5 mm； 使控制鈕緩慢滑回原位； 吸頭移出液面前略等待1秒，至液面穩(wěn)定；緩慢提出移液器，確保吸頭外壁無液體。,切勿突然松開控制鈕，以防溶液吸入過快沖入移液器內，污染活塞，造成漏氣。,排液,將吸頭以一定角度抵住容器內壁；緩慢將控制鈕按至第一檔并等待約1－3秒； 將控制鈕按至第二檔同時，吸頭嘴慢慢離開液面，使槍頭完全排空；按住控制

7、鈕，沿容器內壁拖出吸頭，放開控制鈕；按壓彈射鍵棄掉吸頭。,（特殊情況需抵住容器底部或液面）,反向吸液適用于：易揮發(fā)液體粘稠液體小體積移液,反向吸液一般與預潤濕吸液方式結合使用,相同液體反復吸、排2-3次，吸頭內壁會形成一層同質液膜，可以補償吸頭的表面吸附，再進行移液比較準確。通過預潤濕吸液的方式來可達到精確移液。,吸液、排液注意事項：,六個度：角度——垂直吸液，貼壁排液深度——吸頭浸入液面速度——慢吸慢放（液體越稠要越

8、慢）濕度——將吸頭預潤濕（反復吸排）2～3次適度——吸排液時的停頓時間；配合度——排液的速度與吸嘴離開液面（或內壁）的速度,使用完畢,移液器使用完畢后，按彈射鍵卸去吸頭，把刻度調至最大量程，掛在移液器架上。,切勿將吸頭內含有液體的移液器平放在桌上，以免液體進入活塞污染移液器。,移液器中的O型環(huán)（密封圈）、彈簧和活塞是我們重點養(yǎng)護的對象。,一. 常見問題及處理方法,回彈不暢,1、檢測：下壓控制鈕后，控制鈕卡住或回彈不暢，可如下檢

9、查：,2、可能原因：彈簧受損、活塞污染 處理方法：反饋實驗室管理，請專業(yè)工程師處理。,漏氣（漏液）,1. 檢測： 大量程，吸液后垂直靜置 15 s，觀察是否有液滴； 小量程則會有打不盡的現(xiàn)象。,移液不準,移取體積跟實際體積不相符處理方法：反饋實驗室管理，請專業(yè)工程師校正。,2. 可能的原因： - 吸頭是否匹配？ 處理方法：更換匹配的吸頭 - 裝配吸頭時有無上

10、緊？ 處理方法：上緊吸頭 - 移液器內部氣密性不好？ 處理方法：反饋實驗室管理,實驗結束后，需用75%酒精噴灑移液器套筒部位，并用無屑紙由上至下擦拭消毒，切勿上下反復擦拭，以防污染。定期清潔移液器，可用75%酒精棉擦拭手柄、彈射器及套筒外部，發(fā)現(xiàn)問題及時反饋實驗室管理。實驗結束后，將移液器刻度調至最大量程，使彈簧恢復原形，延長移液器使用壽命。移液器掛置移液器架上。,二. 日常維護保養(yǎng),外置式活塞

11、移液器,其他類型移液器,內部結構,活塞設計在吸頭內部，直接與液體接觸。由于使用全封閉活塞系統(tǒng)從而避免了氣溶膠污染，所以在處理易揮發(fā)、放射性、腐蝕性或有毒物質時更加安全。如Eppendorf  Multipette分液器，配合Combitips分液頭使用。,彈簧,電動移液器,也是利用空氣置換原理，由活塞在活塞套內作定程運動產(chǎn)生負壓，壓入定量的液體。有一內置馬達系統(tǒng)，控制每一移液動作。,一般電動移液器常用模式有：p模式

12、（常規(guī)移液模式）、d模式（重復分液模式）、dd模式（稀釋模式）三種。,Q & A ?,電子天平的類型,根據(jù)傳感器方式,電磁平衡式傳感器（實驗室常用）電容式傳感器應變式傳感器,根據(jù)精度(檢定標尺分度值e)分類,超微量天平微量天平準微量天平分析天平精密電子天平,還可以分為： 千萬分之一天平、百萬分之一天平、十萬分之一天平、萬分之一天平、千分之一天平等,傳感器位置檢測器PID調節(jié)器功率放大器低通濾波器模數(shù)轉換器

13、微計算機,防風罩秤盤顯示器機殼底腳,通過調節(jié)底腳螺絲，使水平儀內氣泡位于圓環(huán)中心。,調水平,放入稱量器皿，關閉側門，去皮清零,取出物品，關閉電源，清潔并記錄,打開開關，自檢,在器皿上放稱量物品，穩(wěn)定后讀數(shù),,,,,被稱物品盡可能放在中央并要求輕放,,,注意事項,通過調節(jié)底腳螺絲，使水平儀內氣泡位于圓環(huán)中心。放入稱量容器后去皮，放入稱量物后應關閉箱門以免空氣流動影響讀數(shù)。稱量易揮發(fā)和具有腐蝕性的物品時，要盛放在密閉的容器內以

14、免腐蝕和損壞電子天平。操作天平不可過載使用，以免損壞天平（量程220g） 。被稱物品盡可能放在中央并要求輕放。保持天平稱量室的清潔，稱量后應及時小心清潔。不得隨意挪動，如需挪動必須再次調水平。若天平在初次接通電源或長時間斷電之后，至少要預熱30min。,常見問題,顯示器完全無顯示或顯示不穩(wěn)定（1） 物品揮發(fā)或者吸濕→放在密閉的容器內（2） 天平放置不穩(wěn)，防風窗未關閉→調整位置，關閉防風窗 （3） 環(huán)境溫度變化大→反饋實驗室

15、管理（4） 電源和交流適配器問題→反饋實驗室管理,微孔板迷你離心機,手掌型離心機,桌面離心機,高速冷凍離心機,板式離心機,機架、轉頭驅動系統(tǒng)控制系統(tǒng)安全保護系統(tǒng)等,離心機的原理,離心就是利用離心機轉子高速旋轉產(chǎn)生的強大的離心力，加快液體中顆粒的沉降速度，把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質分離開。,接通電源，打開離心機蓋（冷凍離心機除外）,配平離心管（數(shù)量、體積），旋緊蓋子,取出物品，關閉電源，清潔并記錄,選擇合適的轉頭和離心管

16、,參數(shù)設置，離心,,,,,待離心機完全停止轉動，才能打開機蓋！,待轉速上升到設定值后，才能離開！,注意事項,離心管內裝載的溶液量必須合適，離心管可裝至2/3處，管蓋必須蓋嚴絕不允許漏液。離心管必須嚴格平衡（數(shù)量及體積）。離心時不準打開機蓋，不準扒扶在離心機上，如有異常聲音和振動時立即停機檢查。離心機需定期清潔，用擦孔棒將管孔仔細擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈，擦凈轉頭室內凝水，開門涼干轉頭室。轉速設定不得超過最高轉速。,常見問題

17、,離心機不轉或轉速達不到設定值 電源電路部分故障；電動機自身故障；轉速控制部分故障?？刂泼姘骞收希粋鞲衅鞴收?→反饋實驗室管理,,,,,工作原理,基于水在煮沸時所形成的蒸汽不能擴散到外面去，而聚集在密閉的容器中，隨著水的煮沸，蒸汽壓升高，溫度也相應增加，熱穿透能力增強，使蛋白質變性或者凝固。,逆時針轉動手輪數(shù)圈，直至轉到頂，使蓋充分提起，推開橫梁，移開鍋蓋,開蓋,放需滅菌的物品，蓋上鍋蓋,取出物品，關閉電源，清潔并記錄,通電，

18、加水,設定滅菌溫度和時間,,,,,控制面板上低水位或缺水位指示燈亮，需向鍋內補充純水,物品之間保留一定縫隙，順時針轉動手輪數(shù)圈，使鍋蓋向下壓緊鍋體，液體滅菌前將瓶蓋旋松,將溫度設定在121℃，時間設定在20~30min,待壓力下降至0再打開鍋蓋！,滅菌前需確保滅菌鍋內水位正常，不足需加純水補充。堆放滅菌物品時，嚴禁堵塞安全閥和放氣閥，否則容易容器爆裂。滅菌液體時，盛液不超過容器的3/4，結束后不可放氣減壓。液體滅菌前蓋子旋松，滅

19、菌結束后及時將蓋子旋緊。壓力表使用日久后，壓力指示不正確或不恢復零位，應及時反饋實驗室管理。需定期檢查安全閥的可靠性，如有異常及時反饋實驗室管理。,干燥箱的原理,通過電能使加熱管加熱，并利用風機循環(huán)熱空氣，確保室內溫度均勻性，熱空氣對潮濕物品加熱，水分也會因加熱變成水蒸氣混入熱風中，達到對箱內物品進行干燥。,把物品放入干燥箱內，關好箱門,設置工作溫度,取出物品，關閉電源，清潔并記錄,打開電源,運行,,,,,根據(jù)物品要求，設置工作溫度

20、,把電源開關撥至“1”處，此時電源開關亮，顯示屏有數(shù)字顯示，再將電機控制開關按至“1”處。,75%酒精擦拭干燥箱內部，作好記錄,干燥箱無防爆裝置，不得放入易燃易爆易揮發(fā)物品。箱內物品放置切勿過擠，必須留有空間，以利空氣循環(huán)。打開箱門取物時請千萬注意，以免燙傷。每次使用結束后，關閉電源。定期清潔，用75%酒精擦拭烘箱內部。若存放環(huán)境濕度大，應定期（1個月左右）通電升溫進行驅潮處理。出現(xiàn)任何異常，需及時反饋實驗室管理。,Q &a