高效液相色譜儀原理及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書

1、高效液相色譜儀原理及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書高效液相色譜儀原理及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書貴州大學(xué)精細(xì)化工研究開發(fā)中心（綠色農(nóng)藥與生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室）1.實(shí)驗(yàn)類型：實(shí)驗(yàn)類型：設(shè)計(jì)型實(shí)驗(yàn)（研究性實(shí)驗(yàn)）2.課時(shí)安排課時(shí)安排：6課時(shí)3.實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x：通過(guò)學(xué)習(xí)高效液相色譜儀的構(gòu)成和使用方法，及其在定性、定量分析中的應(yīng)用，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度、細(xì)致的工作作風(fēng)、實(shí)事求是的數(shù)據(jù)報(bào)告和良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣（準(zhǔn)備充分、操作規(guī)范，記錄簡(jiǎn)明，臺(tái)面整潔、實(shí)驗(yàn)有序，良好的

2、環(huán)保和公德意識(shí)）。培養(yǎng)培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力、理論聯(lián)系實(shí)際的能力、統(tǒng)籌思維能力、創(chuàng)新能力、獨(dú)立分析解決實(shí)際問題的能力、查閱手冊(cè)資料并運(yùn)用其數(shù)據(jù)資料的能力以及歸納總結(jié)的能力等。4.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理高效液相色譜分離是利用試樣中各組分在色譜柱中的淋洗液和固定相間的分配系數(shù)不同，當(dāng)試樣隨著流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱中后，組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次（103106）的分配（吸附－脫附－放出）由于固定相對(duì)各種組分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各組份在

3、色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過(guò)一定的柱長(zhǎng)后，便彼此分離，順序離開色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流信號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。5.實(shí)驗(yàn)設(shè)備實(shí)驗(yàn)設(shè)備高效液相色譜儀、色譜柱、容量瓶、分析實(shí)驗(yàn)室常用玻璃儀器、甲醇等色譜純?cè)噭兯?，濾膜。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。6.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：了解并初步掌握高效液相色譜儀的基本原理與構(gòu)造；了解高效液相色譜儀常用的幾種檢測(cè)器工作原理和使用范圍；學(xué)習(xí)高效液相色譜法分離化合物和檢測(cè)化合物的含量的方法；通

4、過(guò)測(cè)定對(duì)樣品的定性、定量測(cè)定，初步掌握獲得高效液相色譜譜圖和數(shù)據(jù)的一般操作程序與技術(shù)；學(xué)習(xí)樣品制備的方法；了解影響分析測(cè)定的重要因素，學(xué)會(huì)優(yōu)化分析條件；學(xué)習(xí)譜圖和數(shù)據(jù)的處理方法。1)樣品制備樣品制備過(guò)程中，要同時(shí)考慮將被分析的樣品中，可能干擾欲測(cè)組分定量的物質(zhì)盡可能的分離出去。當(dāng)欲測(cè)組分含量很低時(shí)，還要考慮通過(guò)樣品制備使欲測(cè)組分在試驗(yàn)樣品中的含量得以提高，便于進(jìn)行色譜分析。2)定性、定量方法農(nóng)藥制劑的高效液相色譜分析農(nóng)藥制劑的高效液相色

5、譜分析一、目的要求、目的要求1、了解高效液相色譜儀和二極管陣列檢測(cè)器(DAD)的使用范圍、原理和使用方法。2、掌握高效液相色譜含量測(cè)定方法和方法學(xué)的考察。3、本方法的適用性，適用于生產(chǎn)過(guò)程和實(shí)驗(yàn)過(guò)程中中間體和產(chǎn)物含量跟二、基本原理二、基本原理大部分的農(nóng)藥能在紫外可見光區(qū)有吸收，因此選擇高效液相色譜（配DAD檢測(cè)器）對(duì)上述兩種化合物進(jìn)行分離，定性定量測(cè)定。三、儀器與試劑三、儀器與試劑儀器：高效液相色譜儀（配DAD檢測(cè)器）；C18反相柱；容

6、量瓶。試劑：甲醇（色譜純），超純水，濾膜。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。四、試驗(yàn)步驟四、試驗(yàn)步驟1.色譜條件：色譜柱，EclipseXDB反相柱（4.6150mmi.d.）；流動(dòng)相，甲醇：水（70:30vv），檢測(cè)波長(zhǎng)，212nm；流速，1mLmin；柱溫，25?C。2.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取一定量的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相溶解，定容，配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。3.樣品的配制準(zhǔn)確稱取一定量的農(nóng)藥制劑樣品(精確至0.000lg置于25mL容量瓶中，