阿特拉津降解菌生物學(xué)特性的研究,關(guān)鍵降解酶基因克隆及基因簇的構(gòu)建.pdf

1、阿特拉津是一種在國(guó)內(nèi)外廣泛使用的三嗪類除草劑，在雜草防除方面占有重要地位。阿特拉津雖然是一種低毒除草劑，但是它的殘留會(huì)對(duì)后茬敏感作物如小麥、大豆、水稻等產(chǎn)生藥害。因此阿特拉津污染土壤的生物修復(fù)已成為農(nóng)藥污染控制領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，研究微生物降解有助于形成生物修復(fù)的策略。
　　 本研究是從農(nóng)藥廠廢水處理池的活性污泥中分離到一株阿特拉津降解菌 X-4，根據(jù)該菌株的形態(tài)、生理生化特性和16S rRNA基因序列相似性分析，將其初步鑒定為節(jié)桿

2、菌屬(Arthrobacte sp.)。
　　 菌株X-4在 pH6.0-10.0范圍內(nèi)生長(zhǎng)良好，最適生長(zhǎng) pH為6.0，最適生長(zhǎng)溫度為30℃，麥芽糖為其最適生長(zhǎng)碳源，牛肉膏為其最適生長(zhǎng)氮源。在含有100 mg·L-1的阿特拉津的無(wú)碳無(wú)氮培養(yǎng)基中，菌株X-4在42 h內(nèi)對(duì)阿特拉津的降解率達(dá)95.7％。菌株X-4對(duì)阿特拉津的最適降解溫度為30℃。在1 mmol·L-1的濃度條件下，菌株X-4除了對(duì)Cu2+，Mn2+，Hg2+三種重

3、金屬離子敏感外，對(duì)其他常見(jiàn)的重金屬離子都具有良好的抗性，顯示該菌在處理阿特拉津和重金屬?gòu)?fù)合污染方面有一定的應(yīng)用潛力。
　　 根據(jù)已報(bào)道的阿特拉津降解相關(guān)基因設(shè)計(jì)引物，以菌株X-4的總DNA為模板，擴(kuò)增出trzN全長(zhǎng)基因，與C190菌株的trzN，序列相似性為100％，擴(kuò)增出的atzB，atzC保守片段與已報(bào)道的其它菌株相應(yīng)的序列相似性分別為100％、99％，說(shuō)明該菌的降解相關(guān)基因是trzN與 atzBC基因的組合。