茉莉酸甲酯對大豆根部茉莉酸和類黃酮合成的影響.pdf

1、茉莉酸甲酯（MeJA）作為一種信號分子，調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育和誘導(dǎo)植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗性。本實驗室前期研究表明，MeJA對大豆（Glycine max（L.）Merr.）結(jié)瘤有促進(jìn)作用。為了了解外施MeJA是否影響根中一些物質(zhì)的合成從而影響結(jié)瘤，本文通過基因表達(dá)分析和化學(xué)分析的方法探討豆科植物根部茉莉酸和類黃酮物質(zhì)合成情況。
　　 在基因表達(dá)水平，我們選用大邑黑豆為材料，分別用不同濃度的MeJA（0、1、10和100 μM）噴施植株地上部

2、分，用RT-PCR法分析根中內(nèi)源茉莉酸合成途徑丙二烯氧化物合成酶基因GmAOS和異黃酮合成途徑異黃酮合成酶基因GmIFS的表達(dá)情況。結(jié)果表明，100μM MeJA處理大豆能在一定時間內(nèi)誘導(dǎo)根部的GmAOS表達(dá)；對照組、1 μM和10 μM處理組根部GmAOS基本不表達(dá)；GmIFS在處理前后都有表達(dá)。所以大豆外施MeJA，根部GmAOS基因表達(dá)呈現(xiàn)濃度和時間效應(yīng)。
　　 在生理水平，通過頂空固相微萃取-氣相色譜（HS-SPME-G

3、C）和高效液相色譜（HPLC）的方法檢測不同濃度的MeJA噴施大豆地上部分后，根部MeJA、大豆苷元（Da）和染料木素（Ge）的含量變化。HS-SPME-GC檢測內(nèi)源MeJA結(jié)果顯示，隨著處理天數(shù)的增加，MeJA含量大體呈逐漸下降的趨勢，MeJA處理能抑制內(nèi)源MeJA下降速率。HPLC檢測類黃酮結(jié)果表明，Da和Ge含量大體呈逐漸上升的趨勢，其中10μM處理組的Da.和Ge含量明顯比對照組高。
　　 為了進(jìn)一步了解MeJA對豆科植

4、物結(jié)瘤的作用機(jī)理，我們還選用了研究共生結(jié)瘤的模式植物百脈根（Lotus japonicas）為實驗的另一材料，首先克隆了百脈根MG-20茉莉酸合成途徑的關(guān)鍵酶基因LjAOS、LjAOC，LjLOX的片段，然后檢測MeJA處理后百脈根根部LjAOS和LjIFS基因表達(dá)情況。結(jié)果表明，克隆的百脈根茉莉酸合成途徑關(guān)鍵酶基因LjAOS、LjAOC、LjLOX片段和豆科植物苜蓿、大豆等相應(yīng)基因具有較高的同源性，RT-PCR分析表明MeJA處理促進(jìn)