玉米自交系親本及其雜交種的體細(xì)胞克隆變異研究.pdf

1、本文選擇了3個優(yōu)良玉米自交系并配制了2個相互雜交組合，然后以這些材料的幼胚為外植體建立了一套玉米組織培養(yǎng)和再生體系，并利用AFLP和MSAP分子標(biāo)記技術(shù)研究了自交系親本及其雜交種在體細(xì)胞克隆過程中的序列變異和DNA甲基化變異的情況，旨在從分子水平上探討玉米體細(xì)胞克隆變異的機制，進(jìn)而為玉米遺傳改良探討新的途徑和方法。研究工作主要得到以下結(jié)果： 1．基因型對玉米幼胚愈傷組織的誘導(dǎo)影響很大。雜種誘導(dǎo)能力明顯強于自交系，而雜種中正反交對

2、愈傷組織的誘導(dǎo)則沒有明顯的影響。 2．玉米自交系親本及其雜交種在體細(xì)胞克隆過程中存在遺傳變異和基于DNA甲基化水平和模式改變的表觀遺傳變異。雜交種的正反交之間甲基化模式的變異沒有明顯差異。 3．在不同的雜交組合中，玉米體細(xì)胞克隆序列變異情況無明顯差別。與愈傷組織比較，再生苗表現(xiàn)出的變異較少。 4．通過MSAP分析，發(fā)現(xiàn)在幼胚誘導(dǎo)愈傷組織，愈傷組織分化成再生苗的過程中，多數(shù)材料CCGG位點內(nèi)側(cè)C完全甲基化水平和外側(cè)

3、C半甲基化水平及總的甲基化水平有先降低后升高后降低的趨勢，但也有一些基因型的材料這個趨勢不明顯。甲基化變異模式以去甲基化為主(0.9％-9.2％)，超甲基化變異較少(0.6％-3.6％)。 5．兩個雜交組合的AFLP與MSAP之間均存在極顯著的相關(guān)性，表明組織培養(yǎng)過程中表觀遺傳變異和遺傳變異之間可能存在某種內(nèi)在的密切聯(lián)系。 6．對AFLP和MSAP檢測到的變異的DNA片段經(jīng)過測序和同源性分析，結(jié)果表明玉米體細(xì)胞克隆變異發(fā)